Development of the LC-MS method for the determination of psychotropic drugs in biological material

Ciało szkliste oka ze względu na stosunkowo prostą matrycę, izolowane położenie oraz oporność na procesy gnilne zachodzące w organizmie jest z powodzeniem stosowane jako alternatywny materiał do opiniowania w medycynie sądowej. Szczególne znaczenie ma przy tym opracowanie odpowiednich metod przygotowania próbek do prowadzenia czułych analiz toksykologicznych.W wyniku przeprowadzonej procedury walidacji poszerzono zakres stosowalności metody DI-SPME/LC-MS, opracowanej i zoptymalizowanej do analizy leków psychotropowych w próbkach krwi oraz aspiratu szpiku kostnego, o analizę ciała szklistego oka w badaniach post mortem. Zastosowana technika DI-SPME w prosty i szybki sposób umożliwiła selektywną ekstrakcję 24 leków psychotropowych z grupy benzodiazepin, TCA, SSRI, SNRI, a także zolpidemu i karbamazepiny z materiału biologicznego. Niniejsza metoda została opracowana dla minimalnych objętości próbek – 200 µL, co ma szczególne znaczenie w analizach przypadków sądowych. Wyznaczone parametry walidacyjne: LOD, LOQ, zakresy liniowości, precyzja oraz efekt matrycy spełniają założone dla analiz toksykologicznych kryteria, co potwierdza wiarygodność egzaminowanej metody DI-SPME/LC-MS. Badania te mają istotną rolę w pogłębianiu wiedzy na temat identyfikacji ksenobiotyków w ciele szklistym oka oraz opracowaniu czułych metod stanowiących podstawę do prowadzenia rutynowych analiz w tym zakresie.Due to the relatively simple matrix, isolated location and resistance to putrefaction occurring in the body, the vitreous humor of the eye is successfully used as an alternative material in the field of forensic medicine. The development of appropriate sample preparation methods for sensitive toxicological analyzes is of particular importance.As a result of the validation procedure, the scope of applicability of the DI-SPME/LC-MS method, developed and optimized for the analysis of psychotropic drugs in blood samples and bone marrow aspirate, was expanded to include vitreous analysis of the eye in post mortem tests. The DI-SPME technique has made it possible to selectively extract 24 psychotropic drugs from the benzodiazepines, TCA, SSRI, SNRI, as well as zolpidem and carbamazepine from biological material in a simple and quick way. This method has been developed for minimum sample volumes - 200 µL, which is particularly important in forensic case studies. The determined validation parameters: LOD, LOQ, linearity ranges, precision and matrix effect meet the criteria assumed for toxicological analyzes, which confirms the reliability of the DI-SPME/LC-MS method tested.These studies have an important role in expanding knowledge on the identification of xenobiotics in the vitreous humor of the eye and developing sensitive methods that are the basis for conducting routine analyzes in this area