Comparison of apelin's, chemerin's and their receptors' expression level in OVCAR-3 and COV434 cell lines cultured in 2D and 3D conditions

Rozwój technik laboratoryjnych pozwala obecnie na stosowanie zaawansowanych technik hodowli komórkowych. Wśród najczęściej stosowanych wyróżniamy hodowle 2D i 3D. Należy jednak pamiętać, że typ hodowli ma znaczący wpływ na morfologię, żywotność i funkcjonowanie komórek. Z dotychczasowej wiedzy wynika, iż wraz ze zmianą typu hodowli, zmianie może ulec również ekspresja genów. Dotychczas nie były jednak znane zmiany w ekspresji adipokin- hormonów tkanki tłuszczowej, które odgrywają niezaniedbywalną rolę w nowotworach. W niniejszej pracy porównano ekspresję apeliny i chemeryny oraz ich receptorów w komórkach nowotworowych jajnika linii OVCAR-3 oraz COV434 hodowanych w warunkach 2D i 3D. Ekspresję oznaczono za pomocą łańcuchowej reakcji polimerazy w czasie rzeczywistym. Z przeprowadzonych badań wynika, że hodowla 3D wpływa na ekspresję apeliny zarówno zwiększając, jak i zmniejszając jej ekspresję, odpowiednio w linii OVCAR-3 i COV434 . Z kolei poziom ekspresji chemeryny był wyższy w warunkach 3D w linii OVCAR-3 oraz bez zmian w zależności od typu hodowli w linii COV434. W przypadku obu badanych receptorów obserwujemy znaczny wzrost ekspresji w komórkach hodowanych w warunkach 3D. Podsumowując, wykazano, że typ hodowli (2D i 3D) ma znaczący wpływ na ekspresję apeliny, chemeryny oraz ich receptorów.Nowadays, the development in laboratory techniques enables using advanced cell culture techniques. We distinguish 2D and 3D cell cultures and referring to this division, mentioning that type of cell culture has a great impact on cell morphology and function is crucial. Due to current knowledge changing the type of cell culturing is followed by a change in several genes expression. These are the first studies where changes in adipokines expression were investigated. In the research expression of apelin, chemerin and their receptors were compared between 2D and 3D conditions. Two cell lines were used, OVCAR-3 and COV434, origins from epithelial ovarian cancer and granulosa cell tumor respectively. Gene expression was measured using Real-Time PCR. In light of obtained results considering apelin and chemerin both, upregulation and downregulation was observed. Apelin was upregulated in OVCAR-3 cell line and downregulated in COV434 line. Expression of Chemerin increased in epithelial ovarian cancer cells culture and did not differ in granulosa cell culture. The results presented herein also demonstrate upregulation of both receptors’ expression in both used cell lines. To sum up, technique of cell culturing makes a critical impact on adipokines and their receptors expression