The influence of bisphenol S and F on proliferation and estradiol secretion in ovarian granulosa cell tumours - three-dimensional (3D) in vitro culture.

Jednym z najczęściej występujących nowotworów ginekologicznych kobiet jest nowotwór jajnika. Do nowotworów jajnika zalicza się ziarniszczaka, który jest hormonalnie czynnym oraz hormono-zależnym nowotworem. Stwierdzono, że związki endokrynnie czynne (EDCs) takie jak bisfenol A (BPA) mają zdolność wiązania się z receptorami estrogenowymi, zaburzania czynności endokrynnych jajnika jak również i stymulowania progresji nowotworów hormono-zależnych w tym nowotworów epitelialnych jajnika. Chociaż BPA stopniowo jest wycofywany z przemysłu na jego miejsce wprowadzane są związki, których analogiczna budowa sugeruje, że mogą one mieć podobne właściwości zaburzające czynności układu rozrodczego oraz wpływające na progresję nowotworów. Celem niniejszej pracy było zbadanie czy analogi BPA: bisfenol S (BPS) oraz bisfenol F (BPF) wpływają na proliferację komórek linii komórkowych odpowiadających młodocianemu (COV434) oraz dojrzałemu (KGN) podtypowi ziarniszczaka jajnika. Stwierdzono, że nowotwory te tworzą trójwymiarowe struktury dlatego, aby lepiej zbadać wpływ badanych związków na proliferację guzów ziarniszczaka komórki COV434 i KGN były hodowane in vitro w modelu 3D w formie sferoidów. Ponadto postanowiono sprawdzić jaki wpływ na syntezę estradiolu będą miały dane związki. Proliferację komórek zbadano za pomocą testu CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay traktując komórki przez 48godzin związkami w dawkach 0,1nM, 1nM, 10nM, 100nM, 1000nM. Pomiar syntetyzowanego estradiolu przeprowadzono za pomocą testu ELISA stosując te same dawki oraz czas inkubacji, jak w przypadku testu proliferacji. Przeprowadzone badanie wykazało, że BPS oraz BPF stymulują proliferację i jednocześnie obniżają sekrecję estradiolu w linii COV434, natomiast w linii komórkowej KGN związki te nie miały wpływu na oba badane procesy. Niezbędne będą dalsze badania w celu określenia między innymi mechanizmu działania BPS oraz BPF w rozwoju ziarniszczaka. Wyniki te sugerują, że oba badane związki mogą stymulować rozwój młodocianego podtypu ziarniszczaka poprzez zwiększenie tempa proliferacji. Ponadto, poprzez obniżenie wydzielania estradiolu, maskować jeden z głównych objawów pomagających w wykryciu tego nowotworu.One of the most common gynaecological cancers in women is ovarian cancer (OC). Ovarian cancers include granulosa cell tumours (GCTs), that are hormonally-active and hormone-dependent. It has been found that endocrine disrupting compounds (EDCs) such as BPA can bind to estrogen receptors, disrupt the genital system and stimulate cancer progression, like hormone-dependent ovarian epithelial cancer. Although BPA is gradually being removed in the industry, its analogues are introduced. Their analogous structure suggests that they may have similar properties that could disrupt the reproductive system and affect the progression of cancer. This study aimed to examine whether BPA analogs: BPS and BPF have an impact on cell proliferation in juvenile (COV434) and mature (KGN) subtype of granulosa cell tumor. It was found that these tumors form three-dimensional structures, therefore, spheroids were cultured in vitro. Also, it was examined whether BPS and BPF can affect oestradiol synthesis in COV434 and KGN cell line. Cell proliferation was assayed by the CellTiter-Glo® 3D Cell Viability Assay, by treating cells for 48 hours with compounds at doses of 0.1nM, 1nM, 10nM, 100nM, 1000nM. Measurement of the synthesized oestradiol was performed by ELISA using the same doses and incubation time as in the proliferation test. The study showed that BPS and BPF stimulated the proliferation and decreased levels of oestradiol in COV434 cell line, whereas in the KGN cell line these compounds did not affect both tested processes. Further research will be necessary to determine the mechanism of BPS and BPF impact on the development of GCT. These data suggest, that both of these compounds can stimulate the growth of the juvenile type of granulosa cell tumor through the growth of cell proliferation. What more due to inhibiting oestradiol synthesis they can mask one of the main symptoms helping cancer detection