The analysis of spermatogenesis in Pxt1gene knockout mice

Niepłodność to globalny problem, dotyczący milionów par na świecie. W niemal połowie przypadków przyczyną jest niepłodność męska. Problem ten jest wieloczynnikowy, przez co prowadzenie badań i wskazywanie przyczyn obniżenia płodności jest bardzo trudne. Jedną z potencjalnych przyczyn mogą być zaburzenia genetyczne. Pomimo znaczącego postępu genetyki, funkcja wielu genów pozostaje słabo poznana lub nieokreślona. Badania podstawowe pozwalające na zidentyfikowanie roli genów mogą dostarczyć nowych informacji wyjaśniających przyczyny niepłodności.Najpowszechniejszą metodą poznania funkcji genu jest tzw. nokaut genowy. Technika ta pozwala na unieczynnienie wybranego genu badanego organizmu, następnie na podstawie obserwowanego efektu fenotypowego jest określana funkcja usuniętego genu.W niniejszej pracy podjęto próbę przeanalizowania skutków nokautu genu Pxt1 u samców myszy szczepu ICR. Z uwagi na wyłączną ekspresję tego genu w jądrach, spodziewano się zaobserwować zmiany dotyczące procesu spermatogenezy i jakości nasienia. Przeprowadzono analizę histologiczną jądra, oraz analizę parametrów nasienia. W wyniku przeprowadzonych badań zauważono jedynie obniżenie ruchliwości plemników. W ramach niniejszej pracy podjęto też próbę identyfikacji białka PXT1 metodą Western blot, która zakończyła się niepowodzeniem. Niestety testowane przeciwciało okazało się niespecyficzne.Infertility is a global issue, affecting millions of couple worldwide. In almost half of the cases it is caused by the male infertility. This is a multifactorial problem, because of which conducting studies and pinpointing the causes of declining fertility is difficult. One possible source of the problem might be genetic diseases. Despite the significant progress in the field of genetic, function of numerous genes is still poorly known or undetermined. Basic research aiming to identify function of genes might provide new information and explanations of the causes of infertility.The most common method of determining function of a certain gene is so called gene knockout. With this technique chosen gene is inactivated, based on observed phenotypic effect function of the disrupted gene is characterized. This study attempted to analyze effect of the knockout of Pxt1 gene in male mice of ICR strain. Due to exclusive expression of the studied gene in the testis, it was expected to observe changes considering the process of spermatogenesis and semen quality. Histological analysis of testis and analysis of semen parameters were conducted. Only diminished sperm motility was observed, as a result of conducted studies. As a part of the study, an attempt was taken to identify the PXT1 protein using the Western Blot method. Unfortunately, the tested antibodies were unspecific