Comparing the influence of extracts from Centella asiatica cultivated in vitro and in greenhouse on motility and proliferation of human skin fibroblast and HaCaT cells

Centella asiatica (wąkrota azjatycka) to roślina znana ze swych wielokierunkowych właściwości terapeutycznych. Jedną z nich jest wspomaganie leczenia chorób skóry, w tym trudno gojących się ran. Ze względu na coraz większe zapotrzebowanie na ziele wąkroty prowadzone są próby wydajnej hodowli rośliny w warunkach laboratoryjnych. Celem przeprowadzonych doświadczeń było porównanie wpływu wyciągów z Centella asiatica uzyskanych z hodowli klasycznej (szklarniowej) oraz hodowli in vitro na aktywność ruchową i proliferację komórek zaangażowanych w gojenie ran skóry. Zweryfikowano wpływ 24-godzinnej preinkubacji z badanymi ekstraktami na ruchliwość keratynocytów ludzkich linii HaCaT oraz prawidłowych fibroblastów skórnych BJ, wykonując test migracji pojedynczych komórek oraz test zarastania rany in vitro. Porównano również wpływ obecności obu wyciągów na proces namnażania komórek HaCaT. Przeprowadzone badania nie wykazały istotnych statystycznie różnic pomiędzy aktywnością wyciągów pochodzących z różnych hodowli. Wbrew oczekiwaniom, zaobserwowane wyniki nie dowodzą również stymulującego wpływu wodnych ekstraktów z C.asiatica na badane zjawiska związane z procesem gojenia ran. W celu dokładnego poznania mechanizmu działania badanych związków oraz potwierdzenia otrzymanych wyników, konieczne jest jednak przeprowadzenie kolejnych badań, obejmujących optymalizację warunków, w tym czasów preinkubacji, stężeń związków i metod pozyskiwania ekstraktów.Centella asiatica is a plant known for its multidirectional therapeutic properties. One of them is ability to facilitate the treatment of skin diseases, including hard-to-heal wounds. Increasing demand for herb of C.asiatica, encourages the attempts to develop new efficient methods of cultivation the plant under laboratory conditions. The purpose of the performed experiments was to compare the influence of extracts from Centella asiatica cultivated in the greenhouse and in vitro culture on the motility and proliferation of cells involved in wound healing. The influence of 24-hour preincubation with extracts on motility of human keratinocytes - HaCaT and skin fibroblasts - BJ was verified by performing a single-cell migration assay and wound healing assay. The impact of both extracts on proliferation of HaCaT cells was also compared. Conducted experiments did not show any statistically significant differences between extracts of different origin. Unfortunately, stimulation of investigated processes by aquatic extracts from C.asiatica was not confirmed too. In order to improve our knowledge about the mechanism of action of tested extracts and to confirm the results, further research on optimization of conditions, including preincubation times, concentrations of extracts and method of preparing them is required