Assessment of fluvastatin effect on mRNA level for branched-chain α-ketoacid dehydrogenase kinase in rat's' liver.

Kompleks dehydrogenazy rozgałęzionych α-ketokwasów (BCKDH) jest kluczowym enzymem w metabolizmie aminokwasów rozgałęzionych (BCAA). Aktywność BCKDH jest regulowana głównie przez fosforylację/defosforylację podjednostki E1. Fosforylacja katalizowana przez specyficzną kinazę (BDK) prowadzi do inaktywacji, podczas gdy defosforylacja katalizowana przez fosfatazę (BDP) do aktywacji kompleksu. Wykazano, że skutkiem działania fluwastatyny, podawanej w dawce 75 mg/kg m.c. szczurom rasy Wistar przez okres 7 dni jest istotny wzrost aktywności BCKDH w tkance wątrobowej. Można założyć, że wzrost aktywności BCKDH jest związany ze spadkiem ufosforylowania tego kompleksu. Bezpośrednio fosforylację kompleksu BCKDH katalizuje BDK, której aktywność jest w znacznym stopniu determinowana przez poziom mRNA dla tego białka enzymatycznego.Celem pracy była ocena działania fluwastatyny podawanej w dawce 75 mg/kg m.c. na poziom mRNA dla BDK w tkance wątrobowej szczurów. Wykorzystane zostały tkanki wątrobowe szczurów płci męskiej rasy Wistar, pochodzące z przeprowadzonych poprzednio badań w Zakładzie Analityki Biochemicznej UJ CM. Grupie badanej (n=6) oraz kontrolnej (n=6) podawano przez 7 dni odpowiednio, fluwastatynę (w dawce 75mg/g m.c), oraz wodę destylowaną. W tkance wątrobowej określono poziom mRNA dla BDK przy zastosowaniu półilościowej metody reakcji łańcuchowej polimerazy z odwrotną transkrypcją (RT-PCR). Stwierdzono, że fluwastatyna powoduje istotny wzrost poziomu mRNA dla BDK (1,090±0,075 w grupie badanej vs 0,896±0.121 dla grupy kontrolnej, p <0.01).Nie można wykluczyć, że fluwastatyna pobudza transkrypcję genu dla BDK i/lub ogranicza degradację dojrzałego mRNA, co prowadzi do wzrostu jego poziomu.Branched-chain alpha-ketoacid dehydrogenase (BCKDH) is a key enzyme of branched-chain amino acids (BCAAs) metabolism. BCKDH activity is regulated mainly by phosphorylation/dephosphorylation of E1 subunit. Phosphorylation catalyzed by specific kinase (BDK) leads to inactivation, while dephosphorylation catalyzed by specific phosphatase (BDP), to complex activation. It has been shown, that fluvastatin, administered at dosage 75 mg/kg b.w. to Wistar rats during 7 days period increases liver BCKDH activity. It can be assumed, that increase in BCKDH activity is connected with reduced phosphorylation of the complex. Phosphorylation of BCKDH complex is directly catalyzed by BDK, which activity is majorly determined by its mRNA level .The goal of this dissertation was to determine the influence of fluvastatin (at dosage 75 mg/kg b.w.) on mRNA level for BDK in rat hepatic tissue. Liver tissues from male Wistar rats, from experiments previously conducted at the Department of Analytical Biochemistry UJ CM, have been used. Test group (n=6) and control group (n=6) have received, via nasogastric tube, accordingly, fluvastatin and distilled water. mRNA level for BDK has been determined, using semi-quantitative, reverse-transcription PCR (RT-PCR) method. It has been found, that fluvastatin significantly increases the level of mRNA for BDK (1,090±0,075 in test group, vs 0,896±0,121 in control group, respectively, p