Marking of the psychoactive substances, by using the DBS (Dried Blood Spot) method, for the needs of post-mortem chemistry and toxicological analyses.

Jedną z alternatywnych technik przygotowania próbek jest metoda suchej kropli krwi (Dried Blood Spot). Polega na naniesieniu małej objętości badanej próbki krwi na specjalną kartę DBS, na podstawie której przeprowadza się ekstrakcję badanych analitów.Celem pracy było opracowanie metody przygotowania próbki z wykorzystaniem techniki DBS do oznaczania alprazolamu i diazepamu we krwi. Wykorzystano karty FTA DMPK C oraz filtry PTFE 0,45 µm. Przeprowadzono ekstrakcję wspomaganą ultradźwiękami. Mieszaninę ekstrakcyjną stanowił acetonitryl /metanol (1:1). Próbki analizowano za pomocą techniki LC-MS, gdzie fazę ruchomą stanowił 0,1% kwas mrówkowy i acetonitryl. W celu oceny rzetelności opracowaną metodę poddano procesowi walidacji. Określono m.in. zakres liniowości (4,34 – 38,28 ng/ml, R2 > 0,98) oraz precyzję oznaczeń na trzech poziomach stężeń w ciągu jednego dnia (CV 0,98) and precision of markings on three levels of concentrations: within one day (CV < 15%), and between the days (CV < 20%). Diazepam in the post-mortem blood sample was marked on the level equal 53,0 ng/ml. The developed method DBS/UAE/LC-MS can be successfully used to determine the presence of diazepam and alprazolam in the blood due to the satisfactory validation parameters, relatively small content of the blood sample (below 50 µL), quick and easy methodology