Effect of brominated and chlorinated bisphenol A derivative on the proliferation of ovarian cancer cells

Nowotwór jajnika jest jednym z najczęściej występujących nowotworów u kobiet. Na świecie w ciągu roku odnotowuje się ponad 200 000 zachorowań. Ze względu na trudność wykrycia choroby we wczesnym stadium oraz zróżnicowanie cechuje się wysoką śmiertelnością. Do czynników wpływających na rozwój nowotworu jajnika zalicza się związki endokrynnie czynne (EDCs), do których należy BPA oraz jego halogenowe pochodne, które oznaczono w surowicy u ludzi. Dane literaturowe dostarczają informacji o wpływie BPA na proliferację oraz rozwój komórek nowotworowych jajnika. Dlatego celem pracy było zbadanie czy bromowane i chlorowane pochodne BPA: TBBPA i TCBPA wpływają na proliferację komórek w wybranych liniach nowotworowych jajnika: linii komórkowej OVCAR- 3 reprezentującej nabłonkowe nowotwory jajnika oraz linii komórkowej KGN reprezentującej nowotwory komórek ziarnistych jajnika. Pomiar proliferacji przeprowadzono za pomocą testu AlamarBlue stosując dawki 1nM, 10nM i 50nM oraz czasy inkubacji komórek: 48h i 72h. Za pomocą metod Real-Time RT-PCR oraz Western Blot dokonano pomiaru ekspresji receptorów ERs: ERα i ERβ oraz GPR30 w liniach komórkowych OVCAR- 3 oraz KGN. Stosując inhibitory receptorów estrogenowych: ICI 182780 oraz GPR30: G-15 zbadano drogę działania BPA oraz TBBPA. Przeprowadzone badania wykazały, że TBBPA stymuluje proliferację komórek linii OVCAR-3 i KGN natomiast TCBPA nie stymuluje proliferacji w wymienionych liniach. TBBPA oraz BPA wpływa na proliferację komórek zarówno przez ścieżkę GPR30 oraz ER. Potrzebne są dalsze badania w celu poznania mechanizmu działanie pochodnych BPA na rozwój nowotworu jajnika.Ovarian cancer is one of the most common cancer in women. In the world 200 000 diseases are recorder in a year. Due to the difficulty of detection the disease at an early stage and diversity the cancer is characterized by high mortality. Factors affecting development of ovarian cancer are Endocrine Disruptor Compound which include BPA and its halogenated derivatives, which are identified in sera in humans. Literature data provide information about the impact of BPA on proliferation and development of ovarian cancer cells. That’s why a point of my graduation thesis was to examine if brominated and chlorinated derivatives of BPA: TBBPA and TCBPA affect proliferation of cells in selected ovarian cancer lines: OVCAR-3 and KGN cells were used as in vitro models represent epithelial ovarian cancer and granulosa cell tumor. Cell proliferation was conducted through AlamarBlue assay using doses: 1nM, 10nM and 50nM and cells incubation periods: 48h and 72h. Via Real-Time RT-PCR and Western Blot methods a measure of receptors expression: ERs: ERα, ERβ and GPR30 in OVCAR-3 and KGN cells was made. Using inhibitors of estrogen receptors: ICI 182780 and GPR30: G-15, action of BPA and TBBPA was examined. Research showed that TBBPA stimulates proliferation OVCAR- 3 and KGN cells but TCBPA doesn’t stimulate proliferation in these lines. TBBPA and BPA influence proliferation of cells through GPR30 and ER. Further research is needed in order to know an effect of BPA derivatives on development of ovarian cancer