Morphogenesis in vitro cultures of selected explants Euphorbia milii

Euphorbia milii jest rodzimym krzewem dla Madagaskaru. Ciekawą właściwością wilczomlecza jest wydzielanie białego soku- lateksu. Produkowany jest on w rurkach mlecznych, które uchodzą do pędów, liści a także korzeni. W lateksie zawarte są substancje lecznicze, niedawno odkryta niezwykle stabilna proteaza serynowa a także biodegradalny środek zwalczający ślimaki. Może on pomóc w walce ze schistosomatozą, która stanowi porównywalne zagrożenie parazytologiczne w skali światowej jak malaria i należy do tzw. zaniedbanych chorób afrykańskich (NTD). Celem pracy było zbadanie zdolności morfogenetycznych wybranych typów eksplantatów, co może posłużyć w opracowaniu wydajnego systemu regeneracyjnego E. milii. Wybrane eksplantaty (blaszki liściowe oraz fragmenty pędów) były umieszczane na pożywkach indukujących MS (Murashige i Skoog, 1962) w różnych kombinacjach auksyn i cytokinin: kwas indolilio-3-octowy (IAA) razem z 6-benzyloaminopuryną (BAP), kwas indolilo-3-masłowy (IBA) z BAP, kwas naftylo-1-octowy (NAA) z 6-(y,y-dimetyloalliloamino)-puryną (2iP) w różnych stężeniach. Zaobserwowaną odpowiedzią morfogenetyczną była obfita indukcja kalusa na przeważającej ilości eksplantatów na pożywkach z dodatkiem NAA i 2iP. W trakcie hodowli obserwowano formowanie pędów przybyszowych na eksplantatach z pędów, w największej liczbie na pożywce, która zawierała IBA i BAP. Innym rodzajem odpowiedzi morfogenetycznej była ryzogeneza indukowana wyłącznie z blaszek liściowych. Proces ten został otrzymany na 90 % eksplatatach znajdujących się na pożywce z dodatkiem auksyny 0,8mg/l NAA oraz 1,99mg/l cytokininy 2iP. Średnio powstawały 32,2 korzenie na ekspalntat. Z tak otrzymanej hodowli tkankowej można byłoby pozyskiwać naturalne substancje zawarte w lateksie E. milii na szeroką skalę. Analiza histologiczna materiału roślinnego potwierdziła w przeważającej ilości bezpośredni i rzadziej pośredni charakter indukowanej w zastosowanych kulturach in vitro kaulogenezy i ryzogenezy. Obserwowana na blaszkach liściowych ryzogeneza przebiegała w sposób niezsynchronizowany.Euphorbia milii (Leafy spurge) is a native plant to Madagascar. Interesting property of the spurge is secretion white milk called latex. It is produced in special cells – laticifers that reach into the shoots, leaves and roots. The latex contains many medicinally valuable substances, recently discovered extremely stable serine protease and also can be used as biodegradable molluscicide which could help fight with neglected diseases in Africa (NTD). The purpose of this study was to evaluate the morphogenetic ability of selected types of explants. Next it can be used to make an efficient in vitro regeneration system of E. milii. Selected explants (leafs blades and stems) were placed on inducing media based on MS (Murashige and Skoog, 1962) in different combinations of auxin and cytokinin: Indole-3-acetic acid (IAA) with 6- Benzylaminopurine (BAP), Indole-3-butyric acid (IBA) with BAP, 1-naphthaleneacetic acid (NAA) with 6-(y,y-Dimethylallyamino) purine (2iP) in various concentrations. The observed morphogenetic response was callus induction in most of the explants on media containing NAA and 2iP. In the course of the culture was observed forming adventitious shoots on the shoot explants, the largest number on the medium which contains IBA and BAP. Different morphogenetic response was rhizogenesis only induced on leaf explants. This process was obtained at 90 % explants on medium with 0,8mg/l NAA and 2mg/l 2iP. On average formed 32, 2 roots per explant. From this tissue culture can be derived natural substances present in latex E. milii. Histological analysis of plant materials confirmed mostly direct and rarely indirect rhizogenesis, also proved that this process proceeded asynchronously