Opracowanie mikrometody preparatywnego ultrawirowania lipoprotein do oceny wyniku testu tolerancji lipidów u chorych kardiologicznych.

Wstęp. Przy aktualnie obowiązujących standardach terapii chorych kardiologicznych długotrwałe stosowanie statyn obniża wartości lipidów i lipoprotein często poniżej dolnego zakresu referencji, stawiając tym samym wyzwanie diagnostom, pracującym z konieczności na śladowych ilościach materiału biologicznego i z tak trudnym materiałem jakim są frakcje lipoprotein bogatotriglicerydowych (TRL). Test lipemii posiłkowej, test obciążenia lipidami, test tolerancji lipidów, to synonimy bardzo cennego badania diagnostycznego w założeniu diagnozującego dysfunkcję metabolizmu lipidów która w badaniu na czczo może nie być wykryta a dotyczy właśnie metabolizmu TRL, nie cholesterolu.Badani & Materiał & Metody. Grupa badana to chorzy kardiologiczni o stabilnej postaci niedokrwiennej choroby serca. (n=24). Podstawową charakterystykę biochemiczną surowicy uzupełniono analizą dyspersyjności VLDL, uzyskanych specjalnie zaadaptowaną mikrometodą izolacji VLDL. Wykonano symulację testu tolerancji lipidów suplementując wyjściowy materiał - surowicę badanych dwoma rodzajami VLDL o normalnej i patologicznej charakterystyce molekularnej zdefiniowanej za pomocą techniki Dynamicznego Rozproszenia Światła. Wyniki.Wyniki powyższych analiz sfinalizowanych przy użyciu DLS udokumentowały indywidualność obrazów dyspersyjności VLDL i indywidualność odpowiedzi u chorych kardiologicznych na suplement w postaci lipoprotein bogatotriglicerydowych pojawiających się po posiłku. Niemniej jednak, pomimo indywidualności obrazów polidyspersji cząstek VLDL u badanych, suplementacja ‘prawidłowym’ VLDL wyrażnie poprawiała ich charakterystykę molekularną a suplementacja ‘patologicznymi’ VLDL wyraźnie pogarszała obraz dyspersji VLDL. Wnioski. Nieinwazyjna dla lipoprotein technika DLS wydaje się być znakomitym uzupełnieniem mikrometody izolacji lipoprotein w przypadku klinicznej konieczności użycia niewielkiej ilości materiału pobranego od chorego i precyzyjnej analizy materiału z testu tolerancji lipidów.Introduction New therapeutic standards in evaluation of cardiac patients are the cause of rigorously limited plasma lipid and lipoprotein values. It is a challenge for the laboratory diagnostics along with the technical problems with triglyceride rich lipoproteins (TRL) related to its turbidity, high triglyceride and low protein content. The clinically applied methods of choice are the micromethods suitable for small amount of sample specimen and non-invasive to assesss the native structure of lipoprotein. The lipid tolerance test related to diagnostics of triglyceride pathobiology requires the high- quality laboratory performance. Patients & Methods Cardiac patients with stable ischemic heart disease (n=24) were recruited. The simulation of lipid tolerance test finalized with Dynamic Light Scattering (DLS) analysis of Very Low Density Lipoprotein fraction isolated from venous blood by ultracentrifugation micromethod was done. Results. The polydispersity and modality of normal and pathological VLDL supplementary preparations were defined by DLS size profile. Individual response to supplements was detected. Nevertheless it is important to mention that normal supplement improved VLDL particle profile shifted towards small, less atherogenic particles. Pathological supplement mimicking the Metabolic Syndrome or pro-atherogenic diet with specific extra-large particles present in VLDL pattern was identified. Conclusion. Noninvasive measurement of TRL dispersity by DLS applied to lipid tolerance test simulation seems to be the promising method of choice to assess lipoprotein particle profile in laboratory diagnostics