Expression and purification of staphylococcal protease SplE

Gronkowiec złocisty (Staphylococcus aureus) jest istotnym patogenem powodującym infekcje u zwierząt i ludzi. W ostatnich latach pojawiły się szczepy gronkowca oporne na praktycznie wszystkie obecnie dostępne antybiotyki. Rosnąca antybiotykoodporność oraz wzrost ilości zakażeń szpitalnych i pozaszpitalnych przyczynia się do wzrostu zainteresowania badaczy tą bakterią i podjęcia szeregu badań w celu znalezienia alternatywnych sposobów walki z Gronkowcem złocistym. Jedną z potencjalnych możliwości jest terapia kierowana przeciwko proteazom produkowanym przez gronkowca złocistego, które to enzymy uważane są za potencjalne czynniki wirulencji. Aby zaproponować metody neutralizacji tych czynników, konieczna jest ich wcześniejsza szczegółowa analiza biochemiczna i strukturalna. Jednym z białek podejrzewanych o udział w wirulencji S. aureus jest proteaza serynowa SplE. Przedmiotem niniejszej pracy jest opracowanie metody ekspresji i oczyszczania proteazy SplE.Staphylococcus aureus is the main pathogen responsible for bacterial infections in humans and animals. In the recent years strains of Staphylococcus resistant to majority of the available antibiotics have been described. Growing antibiotic resistance and an increase in the number of both hospital-acquired and out-of-hospital infections causes increased interest of the research community aimed at describing alternative methods of combating this pathogen. One of the proposed alternatives are drugs aimed against the proteases expressed by S. aureus, the enzymes which are considered to be virulence factors. To find the adequate method of neutralization of these virulence factors, a thorough biochemical and structural analysis is necessary. One of the proteins suggested to be involved in S. aureus virulence is staphylococcal serine protease SplE. The expression and purification of this protein, in adequate quantity and quality, was the subject of the presented undergraduate research project