Production of monoclonal antibodies with anti-apoptin specificity

Celem przedstawionej pracy magisterskiej było uzyskanie linii komórek hybrydoma produkujących przeciwciała monoklonalne specyficznie rozpoznające białko wirusowe- apoptynę, z wykorzystaniem klasycznej metody hybrydyzacji komórkowej. Splenocyty, wyizolowane ze śledzion myszy immunizowanych apoptyną, unieśmiertelniono poddając je hybrydyzacji z komórkami mysiego szpiczaka. W rezultacie otrzymano 18 linii komórek hybrydoma produkujących przeciwciała skierowane przeciwko apoptynie. Uzyskane przeciwciała zostały przetestowane pod kątem przydatności w podstawowych technikach laboratoryjnych jak ELISA oraz Western blotting. Obecnie trwa szczegółowa analiza przeciwciał spośród których zostaną wybrane klony o najwyższym powinowactwie do antygenu oraz najszerszym spektrum zastosowań. Następnie przeciwciała zostaną wykorzystane do dalszych badań mechanizmów działania apoptyny oraz jej potencjalnego zastosowania jako leku w terapiach antynowotworowych.The aim of this thesis was to obtain a hybridoma cell line producing monoclonal antibodies that specifically recognize the viral protein apoptin, using the classical method of cell hybridization. Splenocytes, isolated from the spleens of mice immunized with apoptin, were immortalized by subjecting them to hybridization with the mouse myeloma cells. As a result, 18 hybridoma cell lines were obtained, all producing antibodies against apoptin. The antibodies were tested for their suitability in basic laboratory applications such as ELISA and Western blotting. Selected antibodies currently undergo detailed analysis to choose the clone with the highest affinity for the antigen and the greatest variety of possible applications. Antibodies will be used to further study the apoptin mechanism of action and its potential use in anti-cancer therapies