Eukaryotic cells models in cytotoxicity testing of plant metabolites.

Znaczna ilość określonych związków chemicznych, w tym także pochodzenia roślinnego, stosowana jest jako składniki produktów kosmetycznych, farmaceutycznych i spożywczych. Różnorodne związki pochodzenia roślinnego używane są przez konsumentów. Dlatego niezbędne są badania nad biologiczną aktywnością tych związków chemicznych, w tym także oddziaływania toksycznego na komórki żywych organizmów. Oznaczenia cytotoksyczności związków chemicznych przeprowadzić można za pomocą odpowiednio opracowanych metod, na przykład MTT, XTT, LDH oraz metod luminometrycznych. Ze względu na możliwość wywołania wpływu toksycznego na materiał genetyczny komórek, ocenie poddaje się także właściwości genotoksyczne związków. Badania genotoksyczności przeprowadza się z użyciem testu mikrojądrowego lub kometowego. Ze względu na duże zainteresowanie właściwościami leczniczymi propolisu i jego znacznym stosowaniem w wielu schorzeniach niezbędne jest precyzyjne określenie jego wpływu na komórki, co było celem niniejszej pracy. Badania cytotoksyczności przeprowadzono z wykorzystaniem linii komórkowej HepG2. Komórki inkubowano w obecności etanolowego roztworu propolisu w stężeniach 10, 20, 50 i 100 µg/ml. Badanie cytotoksyczności przeprowadzono za pomocą testu MTT. Wykazano, że badane roztwory hamowały proliferację komórek w hodowli w stosunku do kontroli. Najsilniej działał roztwór o stężeniu 100 µg/ml. Najsłabszy efekt hamowania proliferacji komórek w hodowli wykazano dla roztworu propolisu o stężeniu 10 µg/ml.A large number of specific chemical compounds, including plant products, are used as ingredients of cosmetics, drugs and food additives. Various plant products are useed by consumers. Therefore, studies on the biological activity of these compounds, including toxic effects on the cells of living organisms are needed. Chemical cytotoxicity assays can be revealed using well designed methods, for example, MTT, XTT, LDH and luminescence assay. Due to the possible cause of toxic effects on the cells’ genome the evaluation of plant products as genotoxic compounds is essential. Genotoxicity tests can be executed by micronucleus assay or comet assay. Due to the large interest in the healing features of propolis and its significant application in many diseases it is necessary to precisely determine its effect on the cells, which was the aim of this thesis. Cytotoxicity studies were accomplished using HepG2 cell line. Cells were incubated in the presence of ethanolic extract of propolis at concentrations of 10, 20, 50 and 100 ug / ml. Cytotoxicity assay was conducted using the MTT assay. It has been shown that the tested solutions inhibited proliferation of cells in culture compared to the control. The strongest was the solution with a concentration of 100 ug / ml. The weakest effect of inhibiting the proliferation of cells in culture has been shown to propolis solution containing 10 ug / ml