The evaluation of doxorubicin cytotoxic activity and selected synthetic derivatives of hydantoin towards the mammalian CHO cell line using proliferation assay EZ4U.

Celem niniejszej pracy jest ocena aktywności cytotoksycznej doksorubicyny oraz wybranych syntetycznych pochodnych hydantoiny wobec ssaczej linii komórkowej CHO z zastosowaniem testu proliferacji EZ4U.Badania eksperymentalne obejmowały na wstępie określenie metabolizmu odczynnika EZ4U w komórkach CHO wraz z ustaleniem optymalnych warunków prowadzenia testu. Następnie podjęto próby oceny działania cytotoksycznego doskorubicyny oraz pochodnych hydantoiny na linię komórek CHO przy pomocy testu proliferacji komórek EZ4U. Cytotoksyczny wpływ doksorubicyny na komórki CHO badano z wykorzystaniem : linii komórek wrażliwych na doksorubicynę - w stężeniach 0,06 μg/ml – 5,8 μg/ml linii komórek opornych na ten cytostatyk - w stężeniach 1,45 μg/ml – 92,8 μg/mlW wyniku przeprowadzonych eksperymentów stwierdzono, iż w badanych stężeniach doksorubicyna wykazuje brak działania cytotoksycznego na komórki CHO.W kolejnej części badań eksperymentalnych linię komórek CHO poddano działaniu syntetycznych pochodnych hydantoiny, z których część posiadała potwierdzoną we wcześniejszych badaniach testem MTT aktywność cytotoksyczną wobec linii komórek HL-60. Dodatkowo zbadano również aktywność cytotoksyczną dwóch pochodnych 3-piperydynopropan-1-olu. Badanie cytotoksyczności wymienionych związków prowadzono w stężeniach 25 μM, 50 μM, 100 μM, 200 μM, 250 μM oraz 500 μM. W wyniku przeprowadzonych eksperymentów nie stwierdzono działania cytotoksycznego badanych związków w danych stężeniach wobec linii komórek CHO.The main aim of this work is the evaluation of doxorubicin cytotoxic activity and selected synthetic derivatives of hydantoin towards the mammalian CHO cell line using proliferation assay EZ4U.Experiments included characterization of the reagent EZ4U metabolism by CHO cells. together with the determination of the optimum test conditions. The cytotoxic effect of doxorubicin was investigated at concentrations recommended for doxorubicin-sensitive cell lines (concentration 0.06 μg/ml - 5.8 μg/ml), as well as doxorubicin-resistant cell lines (concentrations of 1.45 μg/ml - 92.8 μg/ml) of the CHO cells. As a result of the performed assays no cytotoxic effect of doxorubicin within the range of used concentrations on either sensitive or resistant CHO cell lines was shown.In the next part of experimental research, CHO cell line was treated with the series of synthetic derivatives of hydantoin. Cytotoxic activity of some of them was earlier proved by MTT test on the HL-60 cell line. Additionally, the cytotoxicity of two 3-(piperidin-1-yl)propan-1-ol derivatives was checked. Cytotoxic assays were performed for the mentioned compounds at concentrations: 25 μM, 50 μM, 100 μM, 200 μM, 250 μM and 500 μM. During performed tests no cytotoxic effect of the tested compounds on the CHO cell lines was shown under described conditions