Pharmacological regulation of astrocyte morphology in vitro.

Astrocytes are a group of cells of great abundance in the brain. The perform numerous functions enabling the brain to maintain homeostasis, they take part in ignal transmission and developmental and trophic processes. Astrocytes have a unique morphology – they posses many processes which ensheath synapses, taking part in and modulating their function. They also express a large number of receptors, for example ones for glucocorticoids. These steroids have a genomic effect on cells and our project aimed at rsearching these in relation to three genes encoding cytoskeletal proteins (GFAP, ezrin, vimentin). We also analyzed effects of morphine on these genes as it supposed to act via GR receptors. The experiment was based on a primary astrocyte culture which was treated with morphine or dexamethasone for various timecourses. Afterwards we obtained genetic material and performed a PCR reaction with assays for the studied transcripts. Immunocytochemistry for GFAP and vimentin was also performed. The statistical analysis did not return data with any significance but we were able to observe certain tendencies, in a few cases does-dependentAstrocyty to komórki o największej liczebności w mózgu, pełniące różnorodne funkcje umożliwiające mózgowi utrzymanie homeostazy, biorące udział w transmisji sygnałów i procesach rozwojowych i troficznych. Są komórkami o unikalnej morfologii, posiadają liczne wypustki, które pozwalają im kontaktować się z synapsami. Jednocześnie przejawiają ekspresję receptorów dla licznych częsteczek sygnałowych np. glikokortykoidów, których działanie na komórki jest genomowe. Niniejsza praca skupiła się na badaniu wpływu aktywacji receptora GR przez jego sztucznego agonistę, deksametazon, na ekspresję genów dla trzech białek cytoszkieletarnych: GFAP, ezryny i wimentyny. Zbadano także inny związek – morfinę, którą podejrzewa się o działanie poprzez receptory GR. Eksperyment został przeprowadzony in vitro – badanymi związkami traktowano pierwotne kultury astrocytów przez różne okresy czasowe. Następnie pozyskiwano z nich materiał genetyczny i przy pomocy PCR badano poziomy transkryptów dla GFAP, ezryny i wimentyny. Przeprowadzono również barwienia ICC traktowanych astrocytów (obrazujące dystrybucję GFAP i wimentyny). Badania nie dały statystycznie istotnych wyników, jednak pozwoliły zaobserwowac pewne tendencje w działaniu morfiny i deksametazonu, również dawkozależne