ホウレンソウ種子に存在するα-グルコシダーゼの分子多型変化

Two molecular forms of α-glucosidase were isolated from spinach seeds after storage at 4℃ by CM-cellulose column chromatography and gel filtration. The molecular masses of α-glucosidase A and B were 78 kDa and 82 kDa by SDS-PAGE, and 62 kDa and 70 kDa by gel filtration, respectively. α-Glucosidase A had high activity not only toward maltooligosaccharides but also toward α-glucans. The optimum pH was 4.5-5.5 and about 50% of the activity remained after incubation at 65℃ for 20 min. On the other hand, α-glucosidase B had high activity toward maltooligosaccharides but faint activity toward α-glucans. The optimum pH was 5.0 and no activity was found after incubation at 65℃ for 20 min. The enzymatic and immunological properties of α-glucosidase A and B were similar to those of α-glucosidase. Ⅰor Ⅱ, and α-glucosidase Ⅲ or Ⅳ, isolated from spinach seeds without 4℃ storage, respectively. These findings suggest that the α-glucosidase in spinach seeds is modified to be two molecular forms.4℃保存したホウレンソウ種子から2種のα-グリコシダーゼをCM-セルロースカラムクロマトグラフィーとゲル濾過により精製した。α-グルコシダーゼAとBの分子量はそれぞれSDS-PAGEで78kDA、82kDa、ゲル濾過で62kDa、70kDaであった。α-グルコシダーゼAはマルトオリゴ糖だけではなく可溶性デンプンに対して強い加水分解活性を示した。至適pHは4.5-5.5であり、65℃、20分処理後に約50％の残存活性を示した。一方、α-グルコシダーゼBはマルトオリゴ等に対して強い加水分解活性を示したが、可溶性デンプンに対してほとんど活性を示さなかった。至適pHは5.0であり、65℃、20分処理後に活性を消失した。α-グルコシダーゼAとα-グルコシダーゼBは、4℃保存を行わない種子に見出されたα-グルコシダーゼⅠ、Ⅱとα-グルコシダーゼⅢ、Ⅳにそれぞれ酵素化学的性質、免疫化学的性質が類似していた。これらの結果、ホウレンソウ種子に存在するα-グルコシダーゼの分子多型は2種類に収束されることが示唆された