Pathobiochemische Funktionen der p33-Untereinheit des vakuolisierenden Zytotoxins VacA von \(\it Helicobacter\) \(\it pylori\)

Das vakuolisierende Zytotoxin VacA des humanpathogenen Bakteriums \(\it Helicobacter\) \(\it pylori\) besteht aus den beiden Untereinheiten p55 und p33. Ungeklärt ist bislang über welchen Mechanismus die toxische Untereinheit p33 in die Innenmembran der Mitochondrien gelangt. In dieser Arbeit konnte gezeigt werden, dass die 32 N-Terminalen hydrophoben Aminosäuren \(\it in\) \(\it vivo\) für eine Lokalisation zu den Mitochondrien ausreichend sind, während die Translokation in die Innenmembran interne Strukturen erfordert, die den Import in einer \(\it loop\)-Struktur vermitteln. Bei Expression des p33 in der Bäckerhefe \(\it S.cerevisiae\) kommt es zur Entstehung einer erhöhten Menge an reaktiven Sauerstoff-Spezies (ROS) und zur positiven Regulation von Proteinen, die mit der Reparatur von oxidativen DNA-Schäden assoziiert sind. Mit den Ergebnissen dieser Arbeit konnte erstmals ein Mechanismus postuliert werden, welcher VacA für die Entstehung von Mutationen in \(\it Helicobacter\) \(\it pylori\) infiltriertem Gewebe mitverantwortlich macht.The vacuolating cytotoxin VacA of the human pathogenic bacterium \(\it Helicobacter\) \(\it pylori\) consists of the two subunits p55 and p33. It is still unknown which mechanism is used by the toxic subunit p33 to translocate into the inner mitochondrial membrane. In this work it was possible to confirm that the N-Terminus of p33 is sufficient for an \(\it in\) \(\it vivo\) translocation to the mitochondria. The passage across the outer membrane and the insertion into the inner membrane are dependent of internal elements, which facilitate the import in a \(\it loop\)-structure. After expression of p33 in the budding yeast \(\it S.cerevisiae\) an increased production of reactive oxygen species (ROS) and upregulation of proteins involved in the repair of oxidatively damaged DNA was observed. The results from this thesis allowed to postulate a possible mechanism, by which p33/VacA is responsible for the accumulation of mutations in \(\it H.\) \(\it pylori\) infiltrated tissue