Selecci?n in vitro e invernadero de clones de Musa sp. para la evaluaci?n de su resistencia a la Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis, Morelet)

Tesis (M. Sc) -- CATIE, Turrialba (Costa Rica), 1995Se plante? establecer una metodolog?a para la obtenci?n del extracto crudo de Mycosphaerella fijiensis y probar su efecto biol?gico sobre hojas de vitroplantas en invernadero as? como sobre cultivos in vitro de Musa sp. con diferente grado de resistencia a la enfermedad. La investigaci?n se llev? a cabo en los laboratorios de fitopatolog?a, Ganader?a y biotecnolog?a del CATIE. Se utilizaron ocho cultivos monosp?ricos del hongo, los materiales vegetales evaluados fueron: "Gran Enano", "Calcuta 4", "Currar?", "Embrapa-403", "Saba", y "Yangamb?". Los trabajos se iniciaron inoculando conidios sobre las hojas de "Gran Enano" y "Calcuta 4". Se comprob? el grado de resistencia diferencial entre los materiales y la virulencia de las cepas utilizadas. Mediante la inoculaci?n del medio M-1-D, con colonias de M. fijiensis y la aplicaci?n de la metodolog?a descrita se obtuvo el extracto crudo. La aplicaci?n de 20 ul de la diluci?n del extracto crudo en carbonato de sodio al 0.5 por ciento y fosfato monob?sico 0.1M provoc? el desarrollo de lesi?n sobre hojas en todos los cultivares. Sin embargo la evaluaci?n a las 24, 48, 72 y 96 horas permiti? observar diferencias entre los materiales de varios grados de resistencia. Al usar 60 ul del extracto crudo, diluido en carbonato de sodio al 0.5 por ciento y fosfato monob?sico 0.1 M, se observ? reacci?n de necrosis de las c?lulas m?s externas que conforman el callo de "Gran Enano" 72 horas despu?s de la inoculaci?n del medio, este da?o fue en aumento al usar dosis m?s altas. A diferencia, el uso de concentraciones de extracto crudo igualmente altas no provocaron reacci?n en los callos de "Calcuta 4", el cual presenta resistencia a la enfermedad. El an?lisis histol?gico del tejido foliar inoculado con conidios mostr? que la mayor acumulaci?n de compuestos fen?licos se localiz? a nivel de c?lulas oclusivas en el clon "Calcuta 4" y en c?lulas epid?rmicas vecinas en el cultivar "Gran Enano". Esto podr?a explicar parcialmente el comportamiento de los materiales a M. fijiensis. En el an?lisis histol?gico de los tejidos foliares de los seis materiales inoculados con extracto crudo, los cultivares "Gran Enano" y "Currar?" presentaron los mayores niveles de fenoles a las 96 horas despu?s de la inoculaci?n, seguidos por los materiales "Yangamb?" y "Calcuta 4", donde se observ? un aumento en la acumulaci?n de fenoles con el tiempo. Los materiales "Saba" y "Embrapa-403", mostraron bajo contenido de fenoles. El uso del extracto crudo de M. fijiensis permite de manera r?pida y eficaz (48 horas en pruebas de invernadero y 72 horas en cultivos de callos) identificar el grado de resistencia a la enfermedad de los materiales de Musa as? tratados lo que representa un significativo ahorro en tiempo y recursos si pensamos hacer estas pruebas en campo utilizando el pat?geno