Untersuchungen zur Rolle von p62 in der Signaltransduktion von CD40

p62 als ist pleitropes Protein in die verschiedensten Signalwege involviert. Dabei ist die Ver-bindung von p62 zum lysosomalen- und autophagosomalen- Signalweg als auch die Fähigkeit zur Vermittlung von K63-Polyubiquitin Ketten entscheidend. Zum einen werden über p62 die Erregereradikation und die Entstehung einer Entzündungsreaktion im Infektionsgeschehen reguliert, zum anderen werden inflammatorische Signalwege über Adapterproteine wie aPKCζ und TRAF6 moduliert. In dieser Arbeit konnte der Einfluss von p62 auf eine Infektion mit Listeria monocytogenes EGDe und auf die TNFR1- und CD40- abhängige Signaltransduktion untersucht werden. Dabei wurde ein bona fide Makrophagenzellsystem, basierend auf Hoxb8 immortalisierten Knochenmarkzellen etabliert. Durch den Vergleich von Makrophagen aus p62-/-- und p62ΔST- Mäusen mit wt-Zellen konnte die Wirkung von p62 im Detail untersucht werden. Zusätzlich konnte durch die verwendete Deletionsmutante p62ΔST, die eine Deletion der TRAF6 Bin-dungsstelle von p62 aufweist, selektiv die Interaktion von p62 mit TRAF6 analysiert werden ohne dabei mit anderen Funktionen dieses pleiotropen Proteins zu interferieren. Während einer Infektion mit dem intrazellulären Erreger Listeria monocytogenes EGDe hatte eine p62-Defizienz keine Relevanz in der Erregereradikation in BMDM. Allerdings konnte eine erhöhte Sekretion von IL-1β in p62-defizienten BMDM im Vergleich zu wt-BMDM festgestellt werden. Auf der anderen Seite wurde durch p62-Defizienz die Verringerung von inflammato-rischen Signalwegen beobachtet. So wurde die IL-1β Sekretion nach LPS Stimulation in p62-/--M-MØP empfindlich reduziert. Diese Divergenz, ist zum einen durch die methodischen Un-terschiede erklärbar passen aber auch zu dem in der Literatur beschriebenen dualen Charakter von p62. So ist dieses Protein, abhängig von Faktoren wie Autophagozytose und Inflamma-somaktivierung, sowohl in die Modulation von pro-inflammatorische- als auch anti-inflammatorische- Signalwege involviert. Die Bindung an aPKCζ und Regulation von NF-κB über TNFR1 Signalwege wird in der Lite-ratur beschrieben, ein Einfluss auf die Makrophagen-abhängige TNFR1 Signaltransduktion konnte in dieser Arbeit jedoch nicht beobachtet werden. Vielmehr konnte die Einwirkung von p62 auf die TRAF6- abhängige NF-κB Aktivierung durch CD40 Stimulation in M-MØP beo-bachtet werden. Die durchgeführten Versuche zeigten eine verringerte NF-κB Aktivierung in p62ΔST-M-MØP, was in der reduzierten Sekretion des NF-κB Zielgens IL-6 resultierte. Zudem beschreibt diese Arbeit zum ersten Mal die Bildung eines Rezeptorsignalkomplexes bestehend aus CD40, TRAF6 und p62. Damit zeigt diese Arbeit die Funktion von p62 in der CD40-abhängigen Signaltransduktion, die auf eine modulatorische Funktion von p62 in TRAF6-bindenden Rezeptoren der TNF-Rezeptor-Familie hinweist