Untersuchung der Plastizität humaner CD4+CD25+-T-Zell-Subpopulationen anhand ihres Zytokinmusters und spezieller Transkriptionsfaktoren

Es erfolgte die Entwicklung einer Methode, mit der man regulatorische T-Zellen nach IL-4 und FOXP3 sortieren und in Hinblick auf ihr Genexpressionmuster näher untersuchen kann. Diese Methode bietet nun die Möglichkeit, globale Expressionsmuster unterschiedlicher Differenzierungsstufen humaner Treg-Zellen zu untersuchen, um die Linienstabilität bzw. das Differenzierungspotential dieser Zellpopulation aufzuklären. Wichtige Parameter zur erfolgreichen Durchführung der Methode sind eine möglichst kurze Fixierungsdauer mit 0.25%-igem Paraformaldehyd und eine Permeabilisierung mit 70% Ethanol mit anschließender Färbung und zügiger durchflusszytometrischer Zellsortierung sowie eine Inkubation mit Lysepuffer für 1 Stunde bei 65°C vor der RNA-Extraktion mit Trizol