Importation de macromolécules dans les mitochondries et chloroplastes d’Arabidopsis thaliana: étude des séquences de double adressage des aminoacyl-ARNt synthétases et de la voie de synthèse du Gln-ARNtGln

Au cours de ce travail de thèse, je me suis intéressée aux aminoacyl-ARNt synthétases mitochondriales de plantes, enzymes qui assurent l’aminoacylation des ARN de transfert au cours de la traduction. Toutes ces enzymes sont codées par le noyau puis importées dans les mitochondries. La majorité d’entre elles sont également chloroplastiques. Cette double localisation se fait grâce à une séquence d’adressage appelée ambiguë et située en N-terminal des protéines. Nous avons étudié les caractéristiques de ces séquences d’adressage par des expériences de mutagenèse dirigée et de délétion. Nous avons également étudié la voie de synthèse du Gln-tRNAGln dans les mitochondries et les chloroplastes, voie qui fait intervenir une Glutamyl-ARNt synthétase non discriminante et une amidotransférase ARNt-dépendante (AdT). Cette AdT d’Arabidopsis thaliana est la première AdT mitochondriale identifiée à ce jour.During this work, I was interested in the plant mitochondrial aminoacyl-tRNA synthetases, enzyme which catalyze the aminoacylation of the tranfer RNA during the translation. All these enzymes are encoded by the nucleus and then are imported into mitochondria. However, most of them are also chloroplastic. Dual targeting is determinated by an ambiguous signal located in the N-terminal part of these proteins. Thus mutation or deletion have been performed in order to caracterize these target sequences. We also studied the aminoacylation of the tRNAGln in plant mitochondria and chloroplasts. This pathway involves a non-discriminating Glutamyl-tRNA synthetase and the Glu-tRNAGln amidotransferase (AdT). Indeed this enzyme is the first AdT identified in mitochondria