Criopreservação de sêmen canino: efeito da albumina sérica bovina sobre a integridade do acrossoma e taxa de prenhez após a inseminação artificial

The objective of the present study was to compare the in vitro and in vivo profile of frozen dog semen with Tris-bovine serum albumin (TB) and Tris-egg yolk (TE) extenders. Twenty dogs were used as donors. Each dog was stimulated by penile massage and only the sperm-rich fraction was collected weekly until 40 ejaculates were obtained. After macroscopic and microscopic analysis, equal parts of each ejaculate were diluted with TB and TE by the one-step method at 37 ºC. The semen was added to 0.5-mL French straws which presented normal characteristics before freezing and after thawing. Acrosomal integrity was evaluated by double Trypan blue-Giemsa staining, in which alive intact (LI), alive reacted (LR), dead intact (DI) and dead reacted (DR) spermatozoa, were identified by the time of thawing and up to 4 h of incubation at 39 °C, the TE being significantly superior to TB (P<0,01) in the LI and LR variables. The TB being significantly superior to TE (P<0,01) in the DR variable. Female dogs in natural heat were submitted to artificial insemination, 20 receiving TE-semen and 20 receiving TB-semen with the Osiris probe (IMV, L’Aigle, France) and the numbers indicate that TE was significantly better than TB (P<0,01) to pregnancy rate and number of puppies/delivery. We concluded from this study, that TE was better than TB, because this, induced an early acrossome reaction in dog’s sperm.Objetivo do presente trabalho foi comparar a performance de sêmen de cachorro in vitro e in vivo com soro de albumina bovina – tris (TB) e diluente de gema de ovo com Tris (TR). Para isso, foram usados vinte cães como doadores. O sêmen dos cães foi colhido via massagem peniana. Semanalmente a fração rica espermática foi colhida até quarenta ejaculados. Após o exame macroscópico e microscópico, as amostras foram diluídas em partes iguais de cada ejaculado com (TB e TE), pelo método one-step a 32º C. O sêmen foi embalado em palhetas francesas de 0,5 mL, as quais apresentaram características normais antes e após o congelamento. Foi avaliado a integridade cromossômica pelo método de coloração azul tripan giemsa, observando-se espermatozóides vivos intactos (LI), vivos com reação (LR), mortos intactos (DI), mortos com reação (DR). Os espermatozóides foram identificados pelo tempo de descongelamento e após 4 horas de incubação a 39ºC, o (TE) foi significativamente superior ao TB (P < 0,01) nas variáveis LI e LR. O TB foi significativamente superior ao TE (P < 0,01) na variável DR. Cadelas no estro natural foram submetidas à inseminação artificial, vinte delas recebendo sêmen com TE e vinte recebendo sêmen com TB mediante o uso de uma pipeta de Osiris ( IMV, L‘Aigle, France). Os resultados indicaram que o grupo TE foi significativamente melhor que TB (P < 0,01) em relação à taxa de prenhez e ao número de filhotes. Concluiu-se neste estudo que o grupo TE foi melhor que TB, porque isto induziu a uma reação acrossômica mais precoce no sêmen canino