UTILIZAÇÃO DA BACTÉRIA Rhodococcus fascians NA OTIMIZAÇÃO DO PROCESSO DE FORMAÇÃO DE BROTOS DE ACÁCIA NEGRA

Black wattle (Acacia mearnsii) is planted by small farmers in South of Brazil. This species provides cellulose, paper and tannin. Considering the economical importance of black wattle, clonal propagation techniques need to be assessed. The technique described in the present work uses the bacterium Rhodococcus fascians to induce the formation of multiple shoots. When in vitro germinated black wattle plantlets are infected with R. fascians, leafy galls consisting of multiple meristems and bud primordia develop at apical buds. In order to induce the formation of shoots, leafy galls were excised from the plantlets and cultured in culture media containing three-fourth of mineral salts of MURASHIGE and SKOOG (1962) [8] medium (MS), full MS vitamins and organic compounds, 20 g.L-1 sucrose and 7 g.L-1 agar. Three experiments were conducted. In the first one, activated charcoal (AC) was added (2g.L-1) or not to the culture medium. In the second one, three concentrations (0.29; 1.44 e 2.89 mM) of gibberellic acid (GA3) were tested and compared to a control without GA3. In the third one three concentrations (1.0; 2.0 e 5.0 mM) of 2,3,5-triiodobenzoic acid (TIBA) were supplemented to the culture medium. There was no statistical difference between shoot formation on AC containing media and control media. In the second experiment, it was observed that addition of 1,44 mM GA3 to the culture medium induced a higher, but not significant, mean number of shoots. When 2 or 5 mM of TIBA was added to the culture media, the number of shoots per leafy gall was 2.91 and 2.48 respectively, higher than on control medium (1.48).A acácia negra (Acacia mearnsii) é cultivada por pequenos produtores na região Sul do Brasil. Esta espécie produz madeira, celulose e taninos. Devido a essa importância, é preciso estabelecer técnicas de propagação desta espécie em grande escala. Uma técnica que pode possibilitar a formação de brotos múltiplos consiste em utilizar a bactéria Rhodococcus fascians. Quando plântulas de acácia negra germinadas in vitro são infectadas, no lugar do ápice se desenvolvem galhas formadas por centros meristemáticos múltiplos e primórdios de gemas. Para favorecer o alongamento dessas gemas, galhas foram separadas das plântulas e cultivadas em meio de MURASHIGE e SKOOG (1962) contendo ¾ da concentração dos sais, 20 g.L-1 de sacarose e 7 g.L-1 de ágar. Três experimentos foram realizados. No primeiro foi testada a adição ou não de carvão ativado (CA) (2 g.L-1); no segundo foram testadas a ausência e três concentrações (0,29; 1,44 e 2,89 µM) de ácido giberélico (GA3) e no terceiro a ausência e três concentrações (1,0; 2,0 e 5,0 µM) de ácido 2,3,5-triiodobenzóico (TIBA). A adição de CA no meio de cultura não aumentou a formação de brotos, porém inibiu a indução de raizes. Já no segundo experimento, a suplementação de 1,44 µM de GA3 ao meio de cultura provocou a formação de um maior, porém não significativo, número médio de brotos por galha. No terceiro experimento, foi possível observar que as concentrações de 2 e 5 µM de TIBA possibilitaram uma formação de brotos significativamente maior que o meio de cultura desprovido de TIBA