Etude de l’activation de l’inflammasome dans les monocytes, macrophages et cellules épithéliales lors de l’infection SIV dans des modelés pathogène et non-pathogène

Chez les individus infectés par le VIH on observe une augmentation de l’inflammation et de l’activation immunitaire (AI) qui est associée à la progression vers le SIDA. Même en présence de traitements antirétroviraux, les niveaux d’AI restent élevés et sont associés à une morbidité et une mortalité accrues. Les mécanismes moléculaires derrière l’AI ne sont pas bien caractérisés. L’activation des macrophages (Mφ ) et monocytes et la translocation bactérienne peuvent jouer un rôle important. Contraire aux humains, et au model pathogène de l’infection (macaques, MAC), les hôtes naturels du SIV (Singes vertes d’Afrique, AGM), résoudraient l’inflammation aiguë, ils montrent un niveau plus bas de cytokines inflammatoires comme l’IL-1β et l’IL-18 et l’IA chronique est absente. L’IL-1β et l’IL-18 sont produits par le Mφ et les cellules épithéliales de l’intestine (IEC) auprès l’activation de l’inflammasome. Nous avons étudié l’activation de l’inflammasome chez les hôtes naturels, dans quel tissues ceci peut avoir lieu et s’il existe des différences entre les deux modelés d’infection. Pour cela, nous avons mesuré les niveaux plasmatiques de l’IL-1β et l’IL-18 au cours de l’infection ; nous avons analysé le marquage des Mφ , IEC et IL-18 par microscopie confocale; nous avons mis en place des essaies fonctionnels pour l’activation in vitro de l’inflammasome et nous avons développé les outils pour le phenotypage et l’isolation de Mφ et IEC du sang, du poumon, du LAB, des ganglions et de l’intestine. Nous avons montré que l’inflammasome est activé lors de l’infection par SIV dans les modèles pathogène et non-pathogène, en particulier dans l’intestine grêle. Notre étude indique une production plus notable d’IL-18 dans le jéjunum des MAC infectés en comparaison avec des AGM. Nous avons montré que l’inflammasome peut être activé dans les macrophages par des signaux de l’environnement présent lors de la translocation bactérienne et le stress cellulaire, comme le LPS et l’ATP. Nous avons montré de différences au niveau de régulation de la réponse liée à l’inflammasome. Les niveaux d’IL-18BP et l’IL-1RA, les antagonistes de l’IL-18 et l’IL-1β respectivement, sont été plus élevés chez les AGM que chez les MAC. On a trouvé une corrélation entre les niveaux de IL-18BP/IL-1Ra et les niveaux plasmatiques des agonistes chez les hôtes naturelles mais pas chez les MAC, ce qui est indicative de une régulation potentiellement plus efficace chez les AGM.Chronic immune activation drives progression toward AIDS in HIV infection and still remains in low levels in antiretroviral-treated patients increasing the risk of non-communicable diseases. Such non-AIDS co-mobility and mortality is associated with markers of monocyte/macrophage (Mφ ) activation and microbial translocation, but the molecular bases of this phenomenon remain unknown. In contrast to humans and pathogenic animal models of HIV (i.e. macaques, MAC), natural hosts of SIV (i.e. African Green Monkeys, AGM) quickly resolve SIV-induced inflammation and display lower levels of IL-1β and IL-18. IL-1β and IL-18 can be produced by Mφ or intestinal epithelial cells (IEC) upon inflammasome activation with potential multiple roles. Therefore, we studied whether the inflammasome activation upon SIV-infection occurs in natural hosts, in which tissues it might take place and if it differs between models. To do so, we measured plasmatic IL-1β and IL-18 levels along SIV-infection; we performed microscopy staining of Mφ , IEC and IL-18 in tissues, we set-up functional assays for inflammasome activation in-vitro and we developed tools for phenotyping and isolating Mφ and IEC from blood, lung, BAL, LN and gut. We showed inflammasome activation in vivo during pathogenic and non-pathogenic SIV infection evaluated by IL-18 in the gut of MAC and AGM, particularly in the small intestine, as well as by the levels of IL-18 and IL-1β in plasma. Our study indicated higher IL-18 production in the jejunum of SIV-infected MAC as compared to SIV-infected AGM. We showed that signals that might be in the environment during pathogenic SIVmac infection, in particular LPS and ATP as a result of microbial translocation and stress activate the inflammasome of MAC and AGM macrophages. We revealed differences at the level of the regulation between both models, observed by higher levels of IL-18BP and IL-1RA in AGM compared to MAC and correlations between IL-18, IL-1β and their respective antagonists only in AGM but not in MAC