Stanovení retinolu, alfa-tokoferolu, lykopenu a beta-karotenu v lidské plazmě metodou HPLC s UV-Vis detekcí: Aplikace pro klinickou studii

A method is described here for the simultaneous determination of retinol, alpha-tocopherol, lycopene, and beta-carotene in human plasma. The effectiveness of various protein precipitants and extraction solvents was tested. After adequate sample preparation, the samples were injected directed into the HPLC system. The separation was realized on analytical reversed-phase column with a UV-Vis detection. The analytical performance of this method was satisfactory. The intraassay and interaassay coefficients of variation were below 10%. The recoveries were as follows. 97.0% (CV 2.4%) for retinol, 94.6% (CV 1.7%) for alpha-tocopherol, 91.9% (CV 3.6%) for lycopene, and 93.9% (CV 4.2%) for beta-carotene. The levels of selected fat-soluble vitamins in plasma of patients with cardiovascular disease were measured and discussed.Je popsána metoda pro simultánní stanovení retinolu, alfa-tokoferolu, lykopenu a beta-karotenu v lidské plazmě. Byla testována účinnost různých deproteinačních a extrakčních rozpouštědel. Vzorky byly po odpovídající přípravě dávkovány přímo do HPLC systému. Separace probíhala v reverzní fázi, detekce byla UV-Vis. Analytické parametry metody byly vyhovující. Hodnoty variačních koeficientů přesnosti v sérii a mezi sériemi byly pod 10 %. Výtěžnost metody pro retinol byla 97,0 % (CV 2,4 %), pro alfa-tokoferol 94,6 % (CV 1,7 %), pro lykopen 91,9 % (CV 3,6 %) a pro beta-karoten 93,9 % (CV 4,2 %). U pacientů s kardiovaskulárním onemocněním byly měřeny a diskutovány hladiny vitamínů rozpustných v tucích