Activity of digestive enzymes of the bullfrog in the post- metamorphic phase

Com o objetivo de se avaliar a atividade enzimática da tripsina, amilase e lipase no conteúdo intestinal da rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802), 320 animais com peso médio de 3,6 gramas foram distribuídos em baias-teste com temperatura e fotoperíodo controlados. As rãs selecionadas na fase pós- metamórfica receberam ração comercial extrusada ad libitum. Durante 87 dias de experimento, foram efetuadas 29 coletas em intervalos variando de 1 a 8 dias. As coletas do conteúdo intestinal foram feitas mediante a insensibilização das rãs em gelo e água e posterior isolamento do intestino delgado das mesmas. Após cada coleta, todo material foi congelado em nitrogênio líquido e armazenado em freezer, para ser liofilizado posteriormente. A determinação da atividade da tripsina foi realizada utilizando-se Benzoil-D, L-Arginina p-nitroanilida (D, L- BApNA) como substrato. Para os testes de atividade da amilase e lipase, foram utilizados KIT's enzimáticos comerciais, correspondentes a cada enzima. A atividade da tripsina foi registrada no primeiro dia de experimento, enquanto para amilase e lipase isto aconteceu a partir do terceiro dia. A fase inicial é marcada pelo aumento da atividade da tripsina e amilase até alcançar estabilidade, quando os animais ainda estavam na fase de imago. Neste mesmo período, a rã-touro ainda possui baixa capacidade de hidrólise para lipase. No período subseqüente até o final do experimento, a manutenção da estabilidade da atividade e atividade específica da tripsina e amilase foi contrastada pelo contínuo aumento destes parâmetros em relação à lipase. Pode-se concluir que a rã-touro apresenta capacidade para digestão de alimentos de origens protéica, amilásica e lipídica, sendo que, na fase inicial, recomenda-se a utilização de ração rica em proteína e, na fase seguinte, uso de maior quantidade de ingredientes contendo amido e lipídio.With the objective of evaluating the enzymatic activity of the trypsin, amylase and lipase in the intestinal content of the bullfrog (Rana catesbeiana Shaw, 1802), 320 animals with medium weight of 3.6 grams were distributed in stall-test with temperature and photoperiod controlled. The frogs, selected in the post-metamorphic phase they received commercial extruded diet ad libitum. For 87 days of experiment, 29 collections were made in intervals varying from one to eight days. The collections of the intestinal content were performed by the desensitization of the frogs in ice and water and subsequent isolation of the small intestine of the same ones. After each collection, all material it was frozen in liquid nitrogen and stored in freezer to be later liofilizated. The determination of the activity of the trypsin was accomplished being used benzoil-D, L-arginine p- nitroanilide (D, L-BApNA) as substrate. For the tests of activity of the amylase and lipase commercial enzymatic KIT's were used, corresponding to each enzyme. The activity of the trypsin was registered in the first day of experiment, while for amylase and lipase this happened starting from the third day. The initial ixphase is marked by the increase of the activity of the trypsin and amylase to reach a stability when the animals were still in the imago phase. In this same period, the bullfrog still possesses low hydrolysis capacity for lipase. In the subsequent period until the end of the experiment, the maintenance of the stability of the activity and specific activity of the trypsin and amylase was contrasted by the continuous increase of these parameters in relation to lipase. With these results it can be concluded that to bullfrog presents capacity for digestion of ingredients of protein, starch and lipid origin, and in the initial phase the use of rich diet is recommended in protein and in the following phase it can be opted for the use of larger amount of ingredients containing starch and lipid.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológic