Fabrication of electrochemical biosensors for the detection of glucose prepared by covalent immobilization of glucose oxidase on conducting (poly)thiophene films

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2014Biochemical biosensors have emerged as important analytical tools with application in diverse fields and biosensors for the detection of glucose using the enzyme glucose oxidase have been widely investigated. In this work the preparation of biosensors by electrochemical polymerization of (poly)thiophenes, namely 2,2’-bithiophene, 2,2’-bithiophene and thiophene-3-carboxylic acid, and 4,4’-bis(2-methyl-3-butin-2-ol)-2,2’-bithiophene, followed by covalent immobilization of glucose oxidase on the films, using N-Cyclohexyl-N’-(2-morpholinoethyl)carbodiimide metho-p-toluenesulfonate as a condensing agent, is described. The glucose oxidase electrodes with films of 2,2’-bithiophene and 4,4’-bis(2-methyl-3-butin-2-ol)-2,2’-bithiophene were then tested for their ability in detecting glucose from simple aqueous solutions of glucose and from real samples of fruit juices (pear, apricot and peach). p-benzoquinone was used as a mediator in solution. Being this a preliminary study made in a short period of time, the results accomplished were considered very positive.Os biossensores bioquímicos emergiram como importantes ferramentas analíticas com aplicações em diversas áreas e os biossensores para a deteção da glucose que utilizam a enzima glucose oxidase têm sido largamente investigados. Neste trabalho é descrita a preparação de biossensores através da polimerização eletroquímica de (poli)tiofenos, nomeadamente 2,2’-bitiofeno, 2,2’-bitiofeno e tiofeno-3-ácido carboxílico, e 4,4’-bis(2-metil-3-butino-2-ol)-2,2’-bitiofeno, seguida pela imobilização covalente de glucose oxidase nos filmes, usando como agente fixante N-Ciclohexil-N’-(2-morfolinoetil)carbodiimida meto-p-toluenosulfonato. A capacidade dos elétrodos de glucose oxidase obtidos com os filmes de 2,2’-bitiofeno e 4,4’-bis(2-metil-3-butino-2-ol)-2,2’-bitiofeno em detetar glucose a partir de simples soluções aquosas de glucose e em amostras de sumos de fruta (pêra, alperce e pêssego) foi testada. p-benzoquinona foi usada como mediador em solução. Sendo este um estudo preliminar realizado num curto período de tempo, os resultados obtidos foram considerados muito positivos