Role of ERK 1/2 in ethanol-dependent rats

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2016Apesar do impacto negativo do álcool a nível da saúde, social, e económico de uma sociedade ser mundialmente reconhecido, este tem sido uma das drogas recreativas mais utilizadas desde há séculos até à atualidade. Não obstante todas as campanhas existentes, informação disponível, ou mesmo intervenções de autoridades governamentais e não-governamentais com vista a diminuir este consumo, os efeitos psicoativos e de dependência do álcool parecem prevalecer sobre a consciência do consumidor. A diminuição deste consumo de álcool é, portanto, uma prioridade das autoridades atuais. Para tal, medidas estão a ser tomadas a nível mundial, tanto por agências governamentais como não-governamentais. Em particular, este estudo pretende atuar como alerta à população consumidora de álcool. Com tal em vista, ratos foram submetidos a uma dieta enriquecida em etanol, e os efeitos e respostas à presença deste composto (a nível celular) foram analisados. Deste modo, quatro grupos de ratos foram sujeitos a dietas diferentes: o primeiro, a uma dieta enriquecida em etanol (dependentes de etanol); o segundo, ratos dependentes de etanol submetidos a 12h de abstinência (após última administração); o terceiro, ratos dependentes de etanol submetidos a 7 dias de abstinência; o grupo de controlo, não exposto ao etanol. Todas as amostras de cérebro foram recolhidas para comparação, entre grupos, dos valores das concentrações de uma quinase, ERK1/2. Esta quinase é suspeita de estar envolvida em vias de sinalização intracelulares após ativação prévia de outras quinases, iniciada por estímulos variados. A ativação da ERK1/2 foi igualmente analisada através de um ensaio não radioativo que utiliza Elk-1 como um substrato de fosforilação da ERK1/2.Although alcohol is widely known for its negative impacts on a population’s health, social, and economic sectors, it has been one of the most used recreational drugs for centuries, and it is still nowadays broadly consumed. Despite all the campaigns, all the information available, or even all the governmental and non-governmental authorities’ measures in order to diminish this consumption, alcohol’s psychoactive and dependence-producing properties overcome all of this global warnings in people’s sense. To stop or diminish alcohol consumption is, therefore, a priority nowadays. Measures are being taken by governmental and non-governmental agencies, worldwide, in order to do that. Therefore, this study intends to contribute to the increase of awareness of ethanol’s negative impact on health. In order to do that, rats have been submitted to an ethanol enriched diet, and the cellular effects and responses to the presence of ethanol were analysed. So, four groups of rats were submitted to different diets: the first, to an ethanol enriched diet (ethanol-dependent); the second, an ethanol-dependent group submitted to a 12 h withdrawal; the third, composed of ethanol-dependent rats undergoing 7 days withdrawal; finally, the control group (unexposed to ethanol). All the brain samples were analysed in order to determine the different (between groups) expression of ERK1/2. These group of kinases are thought to be involved in signalling defensive pathways following kinases activation caused by a variety of stimuli. The ERK1/2 activation was also investigated in our samples by the means of a non-radioactive kinase assay, which use the Elk-1 as phosphorylation substrate for ERK1/2