Efeito das células T reguladoras nas interacções entre células dendríticas, células T efectoras tipo 1 e células T efectoras tipo17

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Humana e Ambiente). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2009As células T reguladoras são essenciais para o controlo do desenvolvimento de doenças autoimunes. Recentemente foi descrito que a expressão do gene Foxp3 é necessária e suficiente para a geração e função destas células. No entanto, se a especificidade antigénica das células T reguladoras é essencial ou não para a sua função supressora nos tecidos inflamados é ainda desconhecido. Neste projecto pretendemos estudar os efeitos de células T reguladoras específicas e não específicas para o péptido da proteína básica da mielina Ac1-11 (MBP1-11) nos contactos entre células dendríticas, células Th1 e células Th17. Para tal, células T reguladoras e células T efectoras MBP1-11 específicas foram geradas in vitro a partir de células do baço de animais Tg/Tg Foxp3-KIgfp/gfp e células T reguladoras e células T efectoras policlonais foram geradas in vitro a partir de células do baço de animais B10.PL Foxp3-KIgfp/gfp. Para além destas, células dendríticas de murganhos CD11c-YFP foram também utilizadas. Os dados obtidos através da aquisição de imagens de culturas contendo os três tipos de células (células T reguladoras, células dendríticas e células Th1 ou células Th17) sugerem que células T reguladoras MBP-específicas são capazes de impedir os contactos entre células Th1 MBP-específicas e células dendríticas estabelecendo contactos com ambas as células e impedindo, assim, a activação de células Th1 pelas células dendríticas, não se verificando o mesmo efeito para as células Th17. Assim, parece que células T reguladoras MBP-específicas são capazes de se ligar mais eficazmente às células dendríticas do que células T reguladoras policlonais, mas apenas na presença de células Th1 MBP-específicas. No futuro seria importante repetir estas experiências para que se possam verificar estes resultados e observar estes contactos in vivo. Neste caso poder-se-ia utilizar o mesmo modelo animal (EAE), transferir células T reguladoras para estes murganhos e observar o seu efeito nos contactos celulares na espinal medula, o tecido inflamado na EAE.Regulatory T cells (Tregs) are essential for the control of the development of autoimmune diseases. Recently it was described that expression of Foxp3 is necessary and sufficient for Treg development and function. Nevertheless, it’s not known if the antigen specificity of Tregs is necessary for their function. In this project we want to study the effect of Tregs specific and non-specific for the myelin basic protein peptide Ac1-11 (MBP1-11) in the contacts between dendritic cells, Th1 cells, and Th17 cells. In this sense we in vitro generated MBP1-11 Tregs and MBP1-11 effector T cells (Teffs), from spleen of Tg/Tg Foxp3-KIgfp/gfp, and polyclonal Tregs and Teffs from the spleens of and B10.PL Foxp3-KIgfp/gfp. We also used CD11c-YFP dendritic cells (DCs). Based on the data obtained from the imaging of cultures containing these three types of cells (Tregs, Teffs, and DCs) we conclude that MBPTregs inhibit the contacts between MBP-Th1 cells and DCs, establishing contacts with both Th1 cells and DCs. This inhibition doesn’t seem to happen when Th17 cells were in culture. It seems that MBP-Tregs are capable of more efficient inhibition of contacts between Th1 cells and DCs than polyclonal Tregs, although they are not capable of inhibit the contacts between DCs and Th17 cells. Future work should include the repetition of these experiments to confirm the results obtained and in vivo imaging of these contacts. In this sense we can use the same animal model (EAE), transfer Tregs to these mice, and image the contacts between Tregs, Teffs, and DCs in the spinal cord, the target tissue of EAE