Establishment and characterization of an embryonic cell line from sarconesiopsis magellanica

Sarconesiopsis magellanica (Le Guillou) (Diptera: Calliphoridae) es una mosca necrófaga de importancia en medicina humana y veterinaria. Este insecto se ha registrado en Colombia como indicador biológico ya que puede ser utilizado en la determinación del intervalo post-mortem. Por otra parte, los cultivos de células de insectos son una herramienta biotecnológica importante para estudios básicos y aplicados. Aquí se describen, por vez primera, cultivos celulares derivados de tejidos embrionarios de S. magellanica. Huevos de S. magellanica fueron tomados para los explantes. Estos fueron sembrados en los medios de cultivo: L-15, Grace/L-15, Eagle MEM, MM, VP12, MM/VP12 y Schneider. Las características morfológicas, citogenéticas, bioquímicas y moleculares de los cultivos celulares fueron examinados. El crecimiento celular se logró en los medios de cultivo L15, Grace/L15 y Schneider, obteniendo monocapas confluentes a los 8, 10 y 19 días después de realizado el explante. Sin embargo, el medio Schneider fue el más eficiente para desarrollar los subcultivos y 20 pases se han realizado hasta la fecha. La morfología de las células de los cultivos celulares primarios fue inicialmente heterogéneo, pero en la monocapa confluente y en los subcultivos, hubo una mayor uniformidad de la morfología celular, siendo los tipos fibroblastoides los más predominantes. Las células cultivadas exhibieron un número cromosómico de 12 y el complemento cariotípico consistió de 5 pares de cromosomas somáticos y 1 par sexual. Los patrones de cultivo celulares de isoenzimas de S. magellanica coincidieron con las muestras de adultos de la misma especie. El análisis molecular, utilizando RAPD-PCR, demostraron la autenticación de los cultivos de células de esta mosca y su diferenciación de otros cultivos derivadas de dos especies de mosquito. Esta línea celular es un nuevo modelo in vitro que podrá ser utilizada en estudios biomédicos y biotecnológicos.Sarconesiopsis magellanica (Le Guillou) (Diptera: Calliphoridae) is a necrophagous fly that is important in both human and veterinary medicines. This insect has been registered in Colombia as a biological indicator in estimating post-mortem interval. Insect cell cultures are an important biotechnological tool for basic and applied studies, and cell cultures derived from S. magellanica embryonic tissues are described in this study. S. magellanica embryonated eggs were taken for tissue explants. These were seeded in L-15, Grace/L-15, Eagle MEM, MM, VP12, MM/VP12, and Schneider culture media. The morphological, cytogenetic, biochemical, and molecular characteristics of the cell cultures were examined. Cell growth was achieved in the L15, Grace/L15, and Schneider culture media, and the confluent monolayers were obtained 8, 10, and 19 days after the embryonated eggs were explanted. However, the Schneider medium was the most efficient to develop the subcultures, and 21 passages have been maintained. The cell morphology of the primary cell cultures was initially heterogeneous, but in the confluent monolayer and in the subcultures there was greater cell morphology uniformity, fibroblastoid types being predominant. Cultured cells had a chromosomal number of 12, and the karyotypic complement consisted of five pairs of somatic chromosomes and one sexual pair. The cell culture isozyme patterns of S. magellanica coincided with adult samples from the same species. The molecular analysis, using RAPD-PCR, demonstrated the authentication of the cell cultures of this fly and their differentiation from other cultures derived from two sand flies species. This cell line is a new in vitro model that will be used in biomedical and biotechnological studies. © 2013 Journal of Insect Science