Utvikling og karakterisering av en elektromembranekstraksjonsprobe direkte koblet til massespektrometri : Et nytt system for monitorering av in vitro legemiddelmetabolisme i sanntid

En elektromembranekstraksjonsprobe (EME-probe) i mikroskala ble utviklet og koblet direkte til elektrosprayionisering-massespektrometri (ESI-MS). EME-probe/ MS-systemet ble anvendt i in vitro studier av legemiddelmetabolisme mediert av rottelevermikrosomer. EME-proben ekstraherte legemiddelsubstansene og de mest upolare metabolittene fra en 1 mL reaksjonsløsning (37 °C) til en akseptorløsning med 60 mM maursyre. Akseptorløsningen strømmet kontinuerlig gjennom proben med en hastighet på 3 μL/min og førte ekstraktet direkte til MS for deteksjon. Den sentrale delen av EME-proben var en organisk væskemembran (SLM) som ble dannet ved å immobilisere 2-nitrofenyloktyleter (NPOE) i porene på en hullfiber. SLM ble plassert i reaksjonsløsningen, og de ioniserte analyttene migrerte elektrokinetisk over væskemembranen med elektrisk spenning som drivkraft. Ekstraksjonseffektiviteten i EME-probe/MS-systemet kunne lett kontrolleres ved å justere spenningen, lengden av SLM og volumet av reaksjonsløsningen. For å unngå at reaksjonskinetikken skulle bli forstyrret var det viktig at ekstraksjonsprosessen ikke påvirket totalkonsentrasjonen i reaksjonsløsningen i betydelig grad. EME-proben ble derfor operert med en ekstraksjonsspenning på 2,5 V og en 1 mm lang SLM. Disse ”myke” ekstraksjonsbetingelsene var avgjørende for troverdig måling av kinetikkdata. EME-probe/MS-systemet monitorerte in vitro metabolisme av amitriptylin, prometazin, metadon, loperamid og imipramin, og innhentet kinetiske tidsprofiler for modellanalyttene