Caractéristique taxonomique de l'actinomycete streptomyces N174 et étude enzymatique de sa fonction chitosanolytique

L'Actinomycète N174 a été isolé pour la première fois dans le laboratoire du docteur Brzezinski. Cette souche a été retenue parmi plusieurs autres étant donné son activité chitosanolytique supérieure à celle observée chez d'autres microorganismes. La souche N174 a pu être classifiée dans le genre Streptomyces en analysant les acides diaminopiméliques, les acides mycoliques et les sucres cellulaires totaux par chromatographie en couche mince. L'objectif principal de notre travail a consisté à optimiser la production enzymatique de la chitosanase de Streptomyces N174 en variant plusieurs paramètres tels que la composition du milieu de culture et le temps d'incubation. Nous avons entrepris comme deuxième et troisième objectif la séparation de l'enzyme par précipitation à l'acide polyacrylique et la purification de celle-ci sur colonnes chromatographiques. En dernier lieu, les caractéristiques biochimiques de la chitosanase purifiée telles que le pH optimum, la température optimale, la spécificité de substrats, le Km et le Vmax ont été déterminées. La production d'oligomères de glucosamine a aussi été entreprise en faisant des digestions partielles ou complètes du chitosane par l'enzyme purifié. Nous avons pu uniformiser le poids moléculaire des oligomères de glucosamine en effectuant une précipitation à l'acide polyphosphorique