Produzione di resveratrolo in colture cellulari di vite. Un approccio biotecnologico per l\u2019ottenimento di resveratrolo, molecola di grande interesse farmaceutico e cosmetico

Il resveratrolo (3,5,4\u2019-triidrossistilbene) \ue8 un fitopolifenolo sintetizzato da numerose specie di piante in risposta ad infezioni fungine e microbiche e a stimoli abiotici. Le fonti naturali di maggior rilevanza per la dieta umana sono gli acini di vite (Vitis vinifera). Il forte interesse per il resveratrolo \ue8 legato al suo potenziale farmacologico: sono stati documentati suoi effetti antiossidanti e contro patologie tumorali e cardiovascolari. Essendo un metabolita secondario, la sua sintesi in vivo ed in vitro \ue8 stimolata da elicitori biotici e stress abiotici. Sospensioni cellulari ottenute da piccioli della cultivar Barbera sono state trattate con diversi elicitori biotici quali N-acetil-D-glucosammina, D-glucosammina, chitosano e alcuni antibiotici. Le colture liquide sono state monitorate per 15 giorni misurando numero di cellule, vitalit\ue0 cellulare, pH e peso fresco; il contenuto di resveratrolo in cellule e terreno \ue8 stato quantificato tramite analisi HPLC. I risultati migliori sono stati ottenuti nei trattamenti con D-glucosammina 50 \u3bcg/mL e chitosano 50 \u3bcg/mL. Entrambi accrescono il contenuto intracellulare dei due isomeri del resveratrolo rispetto alle colture controllo, ma il monomero ne inibisce il rilascio. Nel caso dell\u2019isomero trans l\u2019elicitazione pi\uf9 forte e duratura \ue8 dovuta alla D-glucosammina, mentre nel caso del cis al chitosano. I buoni risultati ottenuti in laboratorio hanno incoraggiato prove su larga scala in bioreattori da 2,5 e 16 litri. Mediante immunolocalizzazione in protoplasti e analisi al microscopio confocale \ue8 stata individuata la localizzazione intracellulare dell\u2019enzima biosintetico stilbene sintasi: i siti di sintesi del resveratrolo sembrano essere sul lato citoplasmatico di tonoplasto e membrana cellulare