Avaliação química e neurofarmacológica de espécies de Passiflora da América do Sul

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2014.Espécies do gênero Passiflora são utilizadas há muito tempo pela população de vários países como sedativas e calmantes. Na presente tese buscou-se identificar extratos e substâncias isoladas com atividade no Sistema Nervoso Central das espécies P. alata, P. edulis f. edulis, P. ligularis, P. manicata, P. quadrangularis e P. tripartita f. mollissima, de ocorrência na América do Sul. Nesse sentido, avaliou-se a atividade sedativa de quatorze extratos provenientes das folhas, pericarpo ou polpa das várias espécies através do teste do sono induzido por éter etílico em camundongos (v.o.). Os extratos aquosos do pericarpo de P. alata (600 mg/kg) e P. quadrangularis (100 e 300 mg/kg), das folhas de P. quadrangularis (60 mg/kg), P. edulis f. edulis (600 mg/kg) e P. manicata (100 mg/kg) e da polpa de P. ligularis (30, 100 e 300 mg/kg) foram ativos nesses testes. Os extratos das folhas e do pericarpo de P. quadrangularis foram escolhidos para a realização de outros testes neurofarmacológicos e para o fracionamento bioguiado pela atividade sedativa. Além da atividade sedativa, o extrato aquoso do pericarpo de P. quadrangularis apresentou atividade tipo-ansiolítica nos testes de transição claro-escuro (100 mg/kg) e de esconder esferas (600 mg/kg). Na investigação da composição fitoquímica, foi observada a presença de flavonoides em todos os extratos, sendo identificadas a apigenina e a vitexina-2?-O-xilosídeo como os flavonoides majoritários dos extratos do pericarpo e folhas de P. quadrangularis, respectivamente. Observou-se, ainda, a presença de saponinas e aminoácidos no extrato das folhas de P. quadrangularis. A apigenina foi avaliada no teste do sono induzido por éter etílico, no qual mostrou atividade sedativa (0,6 mg/kg) sugerindo ser o principal composto responsável por essa atividade do extrato. Para o extrato aquoso das folhas de P. quadrangularis realizou-se o fracionamento químico, o qual forneceu três frações distintas enriquecidas em aminoácidos, saponinas e flavonoides. Foi observada a atividade sedativa apenas na fração enriquecida em flavonoides (6 mg/kg), o que indica uma correlação entre a atividade sedativa do extrato e os flavonoides presentes. O flavonoide majoritário desse extrato, a vitexina-2?-O-xilosídeo, foi isolado e avaliado no teste do sono induzido por éter etílico, apresentando atividade sedativa (1,0 e 6,0 mg/kg), sendo, por isso, considerado um dos compostos responsáveis pela atividade sedativa. Após a observação da atividade sedativa dos flavonoides apigenina e vitexina-2?-O-xilosídeo, o envolvimento da viaGABAérgica no mecanismo de ação sedativa desses flavonoides foi avaliado pelo teste do sono induzido por éter etílico após pré-tratamento com flumazenil (in vivo) e teste eletrofisiológico do tipo voltage clamp (in vitro). Os resultados permitiram concluir que os flavonoides, após administração oral, parecem atuar via receptores GABAA benzodiazepínicos, porém o mecanismo molecular necessita ainda ser melhor elucidado.Abstract : Species of the genus Passiflora are used in tradicional medicine of many countries as sedatives and mild tranquilizers. In this thesis, we attempted to identify extracts and isolated compounds with Central Nervous System activity from the species P. alata, P. edulis f. edulis, P. ligularis, P. manicata, P. quadrangularis and P. tripartita f. mollissima. The sedative activity of fourteen aqueous extracts from leaves, pericarp or pulp of the species was assessed through the ethyl ether-induced hypnosis test in mice (p.o.). The active extracts were the pericarp extracts of P. alata (600 mg/kg) and P. quadrangularis (100 and 300 mg/kg), the leaves extracts of P. quadrangularis (60 mg/kg), P. edulis f. edulis (600 mg/kg) and P. manicata (100 mg/kg) and the pulp of P. ligularis (30, 100 and 300 mg/kg). The extracts from leaves and pericarp of P. quadrangularis were evaluated in other neuropharmacological tests and the fractionation of the extracts was bioguided by the sedative activity. The aqueous extract obtained from the pericarp of P. quadrangularis showed anxiolytic-like activity in the light-dark transitions (100 mg/kg) and marble burying tests (600 mg/kg). The investigation of the compounds present in the extracts showed the presence of flavonoids in all extracts and we have identified apigenin and vitexin-2?-O-xyloside as the major flavonoids in pericarp and leaves extracts of P. quadrangularis, respectively. The presence of saponins and amino acids in the leaves extract of P. quadrangularis was also observed. Apigenin showed sedative activity (0,6 mg/kg) in the ethyl ether-induced hypnosis test suggesting that the main compound is responsible for this activity of the extract. For the aqueous extract from leaves of P. quadrangularis were obtained three distinct fractions enriched in amino acids, saponins and flavonoids. Only the fraction enriched in flavonoids showed sedative activity (6 mg/kg), which indicates a correlation between the sedative activity of the extract and the flavonoids composition. The major flavonoid of this extract, vitexin-2?-O-xyloside, was evaluated in the ethyl ether-induced hypnosis test, showing sedative activity (1,0 and 6,0 mg/kg). The involvement of GABAergic pathway in the action mechanism of action of apigenin and vitexin-2?-O-xyloside was evaluated in an in vivo and an in vitro test. The in vivo results suggest that the flavonoids can activate de GABAergic pathway through GABAA receptors after oraladministration of the extracts, but the molecular mechanism needs to be elucidated yet