Efeitos do bloqueio de receptores a1 do núcleo mediano da rafe sobre o comportamento alimentar e expressão da proteína Fos

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação Multicêntrico em Ciências Fisiológicas, Florianópolis, 2014A serotonina (5HT) é um neurotransmissor envolvido no controle da ingestão de alimentos. O tronco encefálico é uma região importante para a produção da 5HT, sendo que, uma região de concentração desses neurônios são os núcleos da rafe. Dados da literatura apontam o núcleo mediano da rafe (MnR) como uma região de neurônios serotoninérgicos. Estes neurônios projetam-se para o hipotálamo, região de controle importante para o controle ingestivo. Dados de nosso laboratório revelam que a ativação de receptores adrenérgicos no MnR produz diferentes resultados dependendo do status energético. Injeções de adrenalina no MnR em animais com livre acesso ao alimento provocou o aumento da ingestão de alimentos. Enquanto que a injeção de adrenalina no MnR de animais com alimentação restrita provocou diminuição da ingestão. Essas ações são mediadas por receptores alfa 1 e alfa 2 presentes no MnR. Este trabalho se propõe ao estudo da participação dos subtipos de receptores alfa (a1A, a1B e a1D) na ingestão de alimentos e comportamento em 1 hora ou sobre a ingestão de alimentos em 4 horas após a injeção de antagonista específic no MnR, avaliar a expressão de proteína Fos por imunohistoquímica após injeção de antagonista a1 no MnR em regiões do hipotálamo e amígdala e identificar o tipo de célula da área hipotalâmica lateral está expressando a proteína Fos. Animais saciados receberam injeção intra-MnR de diferentes doses de RS100329, um antagonista específico do receptor a1A, de Rec 15/2615, um antagonista específico de receptores a1B ou de BMY 7378 um antagonista a1D. A dose de 20 nmol de RS100329 aumentou a ingestão de alimentos e a duração e frequência, bem como diminuiu a latência, do comportamento de comer. A injeção de Rec 15/2615 aumentou, na dose de 4 nmol, a duração do comportamento de comer e a ingestão de alimentos na segunda hora de avaliação. A injeção de BMY 7378 aumentou a ingestão de alimentos na primeira hora e também diminui latência e aumentou frequência e duração do comportamento de comer, bem como diminuiu a ingestão de água na segunda hora de experimento. A injeção de prazosina aumentou a ingestão de alimentos e a expressão de proteína Fos na área hipotalâmica lateral e amígdala basolateral. O aumento de expressão de proteína Fos se deu em neurônios orexina reativos. Em conjunto esses dados corroboram os encontrados em trabalhos anteriores da nossa linha de pesquisa, mostrando que a ação da prazosina se dá através de receptores a1A e a1D, uma resposta hiperfágica mais lenta envolvendo o receptor a1B, e ainda que o bloqueio dos receptores a1D diminui a ingestão de água 2h após a injeção. Os dados de imunohistoquimica sugerem que a hiperfagia gerada pelo bloqueio adrenérgico a1 é gerada a partir de regiões relacionadas ao controle motivacional da ingestão de alimentos.Abstract: The serotonin (5HT) is a neurotransmiter enrolled in the control of food intake. The brainstem is an important site for the production of 5HT, particularly the raphe nuclei. According to literature the median raphe nucleus (MnR) is an important source of prosencephalic 5HT. Data from our laboratory revealed that activation of adrenergic receptors in the MnR evoke different results depending on nutritional status. Adrenaline injections into the MnR in free feeding animals results in hyperphagia. While in food restricted animals adrenaline injections into the MnR evoked hypophagia. This actions seem to be mediated by alfa receptors in the MnR. The purpose of this work is to study the participation of alfa1 subtypes (a1A, a1B e a1D) in food intake and behavior (for 1h after injection) and food intake for up 4h after injection. Also, we proposed to evaluate Fos protein expression after a1 antagonist injection into the MnR on regions of hypothalamus and amygdala, and identify the type of cell in the hypothalamic area to express the Fos protein. Free feeding animals received intra-MnR injection of different doses of RS100329, an a1A antagonist, Rec 15/2615 an a1B antagonist or BMY 7378 an a1D antagonist. The 20 nmol dose of RS 100329 increased food intake, duration and frequency of eating and decreased latency to start eating. The 4 nmol dose of Rec 15/2615 increased the duration of eating behavior and food intake 2h after injection. BMY 7378 increased food intake during the first hour and decreased latency, and increased duration and frequency, of eating behavior. BMY 7378 also decreased water intake 2h after the injection. Prazosin injection into MnR increased food intake and Fos protein expression in lateral hypothalamic area and basolateral amygdala. The increase of Fos protein was specifically higher in orexin reactive neurons. Collectively, our results corroborates data from previous work, showing that prazosin actions occur through a1A and a1D receptors, that a1B blockade is responsible for a slowly hyperphagic response and that blockade of a1D receptor is involved in the decreased water intake. Immunohistochemistry data suggest that hyperphagia observed by a1 blockade is related to motivational control of food intake