Confiabilidade da coloração hematológica rápida para citologia de escarro induzido

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2013.Introdução: A análise do escarro induzido é importante na avaliação de condições inflamatórias das vias aéreas nas duas principais doenças respiratórias obstrutivas: asma e doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC). Devido à heterogeneidade das características clínicas e funcionais destas doenças, existe a necessidade de determinar o fenótipo clínico do paciente, para otimizar o seu manejo, especialmente nos casos mais graves. Contudo, o uso do escarro induzido na prática clínica ainda é restrito em virtude da metodologia envolvida na indução e processamento do escarro. Objetivos: determinar a confiabilidade da coloração hematológica rápida para a análise do escarro induzido, visando a diminuição do tempo e custo do processamento das amostras. Métodos: estudo transversal que compara a técnica de coloração May-Grünwald-Giemsa (considerada padrão) com a coloração hematológica rápida (corante Panótico Rápido). Participaram do estudo 50 indivíduos, sendo 21 portadores de asma, 19 portadores de DPOC e 10 indivíduos hígidos sem sintomas respiratórios. Após indução do escarro, foram geradas quatro citospinas, sendo duas coradas pela coloração padrão e duas pela coloração de estudo. As citospinas foram lidas independentemente por duas bioquímicas treinadas para leitura de escarro, estando as lâminas codificadas, impedindo a identificação dos respectivos pares de citospinas ou acesso a resultados anteriores. A confiabilidade do método foi avaliada pela concordância entre observadores e intra-observador para as contagens celulares resultantes dos dois métodos de coloração através do Coeficiente de Correlação Intraclasse (CCI) e a concordância da identificação de escarro neutrofílico e eosinofílico entre observadores e entre as duas colorações foi calculada através do Kappa estatístico. Resultados: O CCI apontou concordância quase perfeita entre os observadores para as contagens celulares de neutrófilos, eosinófilos e macrófagos para a coloração May-Grüwald-Giemsa e para a coloração hematológica rápida (CCI = 0,81-1,0). A concordância para as contagens de linfócitos entre observadores foi substancial para o corante May-Grüwald-Giemsa (CCI=0,76) e quase perfeita para a coloração hematológica rápida (CCI=0,83). O CCI mostrou uma concordância intra-observador quase perfeita para neutrófilos, eosinófilos e macrófagos. Para as contagens de linfócitos, o CCI apontou concordância substancial para um os dois observadores (CCI= 0,65 e 0,75). A concordância entre observadores na identificação de escarro eosinofílico e neutrofílico em citospinas coradas pelos doismétodos do estudo foi de substancial a quase perfeita (kappa = 0,75 ? 1,0). A concordância intra-observador, embora considerada substancial, foi inferior do que aquela entre observadores. Conclusão: A coloração hematológica rápida pode ser considerada alternativa confiável para o processamento das amostras de escarro induzido. Abstract : Introduction: Induced sputum analysis is an important tool to access inflammatory conditions of the airways in the main obstructive respiratory diseases: asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD). The heterogeneity of functional and clinical characteristics in these diseases shows the need to determine the clinical phenotype for better clinical management, particularly in the more severe cases. However, the use of induced sputum in clinical practice is restricted, due to the complex methods involved in sputum induction and processing. Objectives: to determine the reliability of the use of a rapid hematologic stain in the analysis of induced sputum, in attempt to reduce the time and costs of sample processing. Methods: cross-sectional study to compare May-Grünwald-Giemsa staining (considered standard) to rapid hematologic staining (Diff-Quick). Fifty subjects were included in the study, 21 asthmatics, 19 patients with COPD and 10 healthy individuals without respiratory symptoms. After sputum induction, four slides were generated, two of them stained with May-Grüwald-Giemsa and the other two stained with rapid hematologic stain. The cytospins were independently counted by two biochemists qualified to sputum examination. The slides were coded preventing the identification of the respective pairs of slides or previous results. The reliability of the method was evaluated through intra-observer and inter-observer agreement between the cell counts obtained from the two staining methods, using the Intraclass Correlation Coefficient (ICC), and the agreement identifying neutrophilic or eosinophilic sputum was evaluated through kappa statistic. Results: ICCs indicated an almost perfect agreement between observers for the cell counts of neutrophils, eosinophils and macrophages for both staining techniques (ICC = 0,81 ? 1,0). The agreement between lymphocytes counts was substantial for May-Grünwald-Giemsa stain (ICC = 0,76) and almost perfect for the rapid hematologic stain (ICC = 0,83). Intra-observer agreement was almost perfect for neutrophils, eosinophils and macrophages counts. For lymphocyte counts the coefficient showed substantial agreement for both observers (ICC = 0,65 - 0,75). The agreement in identification of eosinophilic or neutrophilic sputum was from substantial to almost perfect (kappa = 0,75 ? 1,0). Although the intra-observer agreement was substantial, inter-observer agreement was higher. Conclusion: the rapid hematologic stain is reliable and can be considered suitable for sputum examination