Synthèse de DNA viral dans des cellules permissives transformées par le mutant TS-P155 du virus du polyome

Cette étude traite de l'induction de la synthèse de DNA viral dans les cellules embryonnaires de souris transformées à 39°C par le virus P-155, un mutant thermosensible du virus du polyome. Ces lignées cellulaires appelées "Cyp" (Bourgaux et coll., Virology, 88: 348 (1978)) sont inductibles: leur transfert de 39°C (température restrictive) à 33°C (température non restrictive) est suivi d'un effet cytopathogène très marqué, d'une synthèse importante de DNA viral et de production de virus. La réplication du génome viral débute 14 hres après transfert à 33°C, atteint un maximum après 32 hres et décroît progressivement après 72 hres. La synthèse de DNA viral amorcée à 33°C est inhibée si les cellules sont remises à 39°C. Les cellules "Cyp" produisent du DNA viral en l'absence de toute division cellulaire et les cellules sous-cultivées sont plus efficacement inductibles que les cellules non sous-cultivées. Les cellules CYP C12 et C13 accumulent du DNA viral à 33°C jusqu'à une durée de 24 hres. Le traitement par les enzymes de restriction du DNA viral produit dans les clones C12 et C13 et du DNA du mutant ts-P155 génère des fragments de poids moléculaires identique. Un des clones CYP sélectionnés en milieu agar (C12-22/a1) produit à 33°C des molécules de DNA cycliques dont le poids moléculaire est ± 1,30 fois celui du génome du virus du polyome, molécules appelées Rm I. La carte physique de Rm I a été dressée à l'aide d'enzymes de restriction. Elle montre que chaque molécule Rm I contient, en plus du génome viral complet (100%), une séquence unique de DNA (30%) insérée dans le DNA du virus du polyome, entre les positions définies comme 26.6 et 32.6 sur sa carte physique. L'importance du site d'insertion et de la composition de ce fragment de DNA additionnel est discutée