Étude de la variante d'histone H2A.Z de Saccharomyces cerevisiae dans un système de transcription in vitro sur une matrice chromatinienne reconstituée

L'ADN des organismes eucaryotes doit subir une compaction extrême afin d'être contenu entièrement dans le noyau de chaque cellule. Ce niveau de densité est atteint grâce à l'association de l'ADN avec de petites protéines structurales que l'on nomme histones. Bien que plusieurs autres protéines entrent dans sa composition, comme des protéines"high mobility group" (HMG), l'agencement ADN-histones est à la base de la chromatine. Cette structure très dense est généralement un obstacle aux processus biologiques impliquant l'ADN, comme la réplication, la réparation et la transcription. Des mécanismes de remodelage de la chromatine existent pour réduire ce niveau de condensation de manière locale, afin de rendre l'ADN accessible aux enzymes effectuant ces processus. Ce remodelage peut être effectué par des complexes dépendants de l'ATP, par la modification covalente des histones, ou encore par l'incorporation de variantes d'histone. Dans le cadre de mes travaux, nous avons étudié le rôle de la variante d'histone H2A.Z en transcription génique dans un système in vitro . Pour ce faire, nous avons cloné, surexprimé et purifié chacune des quatre histones principales de la levure Saccharomyces cerevisiae ainsi que la variante Z de l'histone H2A. Des octamères d'histones contenant deux copies de H2B, H3, H4 et soit H2A ou H2A.Z ont par la suite été reconstitués.--Résumé abrégé par UMI