Le facteur de transcription TFIIA localisation et interactions

Nous avons utilisé la méthode de N 3 R-dUMP-photocross-linking pour sonder la composition et la topologie d'un intermédiaire du complexe de pré-initiation de la transcription ("pre-initiation complex" ou PIC), le complexe ADN-TBP-TFIIA. Cette méthode permet de placer le nuciéotide photoréactif N 3 R-dUMP à une position précise le long d'un brin d'ADN. Nos résultats de pontage démontrent que les facteurs TBP et TFIIA entourent le promoteur sur une distance de deux tours et demi d'hélice, allant de la position -20 jusqu'à la position -48 sur le promoteur Ad2ML. L'étendue des contacts du complexe TBP-TFIIA sur le promoteur Ad2ML offre une grande région d'interaction avec d'autres FGTs, incluant l'ARN pol II, ou des facteurs de régulation de la transcription. Nous avons étudié l'interaction de TFIIA avec les autres membres du PIC par chromatographie d'affinité. Nos résultats démontrent que TFIIA interagit avec la grande sous-unité de TFIIF, RAP74, et avec les deux sous-unités de TFIIE, TFIIE34 et TFIIE56."--Résumé abrégé par UMI