Estudo comparativo de cicatrização entre matrizes de regeneração dérmica em pele de camundongo

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do DesenvolvimentoIndivíduos acometidos por queimaduras graves e/ou extensas ou por grandes feridas, ou seja, que apresentam perda significativa de tecido epitelial, são considerados pacientes gravemente enfermos uma vez que a falta massiva da pele resulta em perdas hídricas e deixa o organismo mais susceptível à infecções. Quando estes pacientes sobrevivem, após tratamento intensivo e prolongado, se deparam com cicatrizes desfigurantes, não funcionais e contraturas graves da pele. No presente trabalho foi realizada uma análise comparativa do processo de cicatrização entre as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® em pele de camundongo Mus musculus, através de ensaios in vivo. Os animais foram separados em três grupos e posteriormente levados à cirurgia para a retirada de 1cm2 da pele do dorso. No grupo1 (G1), no local da excisão não era colocado matriz de regeneração dérmica, ficando o ferimento exposto para cicatrização por segunda intenção; no grupo 2 (G2), no local da excisão colocava-se, matriz de regeneração dérmica Integra® e no grupo 3 (G3), colocava-se matriz de regeneração dérmica Pelnac®. Eram realizadas biópsias com 3, 6 e 9 dias de pós-operatório, onde o material retirado era processado para emblocamento em parafina e posteriormente cortado e corado com hematoxilina-eosina e tricrômico de Masson . O estudo dos cortes histológicos corados com hematoxilina-eosina tinham como objetivo a análise do processo inflamatório, análise da celularidade e neoformação vascular. Com a coloração tricrômico de Masson pretendia-se fazer uma análise da presença de colágeno e fibrose. O estudo do processo inflamatório revelou uma discreta diferença entre as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® no sexto dia de pós-operatório, onde, neste momento, a matriz Pelnac® mostrou-se mais efetiva em conter a inflamação. A celularidade mostrou-se praticamente igual em todos os grupos e em todos os dias estudados, com discreto aumento no terceiro dia na matriz Integra®. Ambas as matrizes apresentaram células gigantes de corpo estranho. Isso nos sugere que ambas os substitutos não tiveram comportamento imunológico totalmente inerte, como esperado. A presença de neovasos ocorreu de forma efetiva em todos os grupos, porém não de forma acelerada. Não houve necrose tecidual em nenhum dos grupos estudados. A análise pela coloração tricrômico de Masson foi realizada somente de forma qualitativa devido a presença muito discreta de fibrose em nosso grupo experimental. Não observamos alterações cicatriciais severas, sendo que a mesma ocorreu de maneira uniforme em todos os grupos analisados, sem a presença de cicatrizes hipertróficas ou retrações teciduais. O resultado estético e funcional final foi viável, inclusive com presença de pilificação. Conclusão: A formação de neovasos foi semelhante em todos os grupos estudados, sugerindo uma não interferência das matrizes na neoformação vascular neste modelo experimental. A densidade de células inflamatórias por área apresentou-se um pouco maior na matriz de regeneração dérmica Integra no terceiro dia de pós-operatório, sugerindo que esta matriz possa apresentar um comportamento mais pró-inflamatório. Ambas as matrizes apresentaram células gigantes de corpo-estranho. Este resultado nos mostra que os dois substitutos dérmicos estudados não apresentaram um comportamento totalmente inerte, como é o desejado. Há portanto, necessidade de melhorias em ambos os produtos, neste sentido. Com a matriz de regeneração dérmica Pelnac® houve menos processo inflamatório no sexto dia de pós-operatório. No entanto, a cicatrização da pele nos animais sem matriz de regeneração dérmica e com e com matriz de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® se deu de forma semelhante, onde todas apresentaram uma cicatriz normal, com ausência de fibrose ou cicatrização hipertrófica. Deste modo, as matrizes de regeneração dérmica Integra® e Pelnac® não apresentaram interferência no resultado final da cicatrização em relação às feridas sem matriz neste modelo experimental. Para estudos de cicatrizes hipertróficas ou retração de feridas, portanto, há necessidade de um aperfeiçoamento do mesmoThree animal groups were taken to surgery consisting of removal of 1cm2 skin in the back. Group 1 (G1) animals were not treated with skin substitutes, leaving the exposed wound to heal second intention; Group 2 (G2) animals were treated, at the site of excision, with skin substitute Integra® and Group 3 (G3) animals were treated with skin substitute Pelnac®. Biopses were performed at the 3rd, 6th and 9th days after surgery. The material was then processed for histological procedures and stained with hematoxilin-eosin (HE) and Masson trichrome. HE staning was used to evaluate the linear inflammatory process, cellularity and neovascularization. On the other hand, Masson trichrome was used to analyze the presence of collagen and fibrosis. The study of inflammatory process revealed a slight difference between at the 6th day after surgery, being Pelnac® more effective in containing inflammation. The cellularity was similar in all analyzed groups in all the period studied, with a slight increase on the third day in dermal template Integra®. Both skin substitutes contained giant cells of foreign body. This suggests that both skin substitutes were not totally immunologically inert, as expected. Neovascularization were observed in all groups. Necrosis was not observed in any group. Masson staining reveled very discreet fibrosis in our experimental group. We did not observe cicatricicial changes, that was uniform in all groups, without presence of hypertrophic scars or tissue retraction. The final functional and cosmetic result was acceptable, even the presence of hairiness. Conclusion: The formation of new vessels was similar in all groups studied, suggesting a non interference matrices of neovascularization in this experimental model. The density of on inflammatory cells per area showed a little increase in dermal template Integra 3rd day after surgery, suggesting that this skin substitute display a pro-inflammatory action. Both matrices showed giant cells of foreign body. This result shows that both skin substitutes studied did not have a totally inert behavior, as is desired. Improvements in both products are needed. With Pelnac® there was less inflammatory process in the 6th pós- operative day. However, skin healing was similar in all animal groups including those animals maintained without skin substitutes, with normal scarring, no fibrosis and nor hypertrophic scarring. Thus, the skin substitutes Integra® and Pelnac® did not significantly affected the healing wounds. Improvement in the animal model is need for studies of wound contraction or hypertrophic scar