Análise do comportamento de fibroblastos gengivais cultivados sobre diferentes tipos de membranas reabsorvíveis

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2010Cirurgias para reconstrução de tecido mole que utilizam material autógeno aumentam a morbidade e o riscos de complicações com a segunda área cirúrgica. Como alternativa para eliminar esses inconvenientes, a engenharia tecidual busca encontrar um arcabouço ideal para carrear células e fatores de crescimento responsáveis pela criação de tecidos em ambiente in vitro. Dessa forma o objetivo deste estudo é analisar quatro membranas absorvíveis como potencial arcabouço para a engenharia de tecidos. Foram utilizados fibroblastos humanos gengivais provenientes de cultura primária. Quatro membranas foram utilizadas: Osseoguard®, Genderm®, ácido poli(ácido lactico-co-glicólico) (PLGA) e ácido poli(ácido lactico-co-glicólico) associado com hidroxiapatita (PLGA+HA). Testes de proliferação, análise da degradação através da microscopia eletrônica de varredura (MEV), teste de viabilidade celular (MTT) e análise do pH do meio de cultura foram os métodos utilizados para avaliar as membranas. Os índices de proliferação não foram estatisticamente significativos entre grupos, contudo todas as membranas possibilitaram a proliferação celular. A análise do MEV mostrou que as membranas com base polimérica (PLGA e PLGA + HA) apresentam características mais apropriadas a arcabouços para engenharia tecidual. Os níveis de viabilidade celular diminuíram e os níveis de pH foram similares para todos os grupos exceto o PLGA que se apresentou ácido. A membrana de PLGA + HA é a que apresenta melhores características biológicas e estruturais para funcionar como arcabouço para a engenharia de tecidos.Soft tissue reconstruction using autogenous material increases morbidity and risk of complications with the second surgical area, the donor site. As an alternative to eliminate these drawbacks, tissue engineering seeks to find an ideal scaffolds to wash cells and growth factors that are responsible for a tissue environment fabrication in vitro. Thus the aim of this study is to analyze four absorbable membranes as a potential scaffold for tissue engineering. Human gingival fibroblasts (HGF) from primary cell culture were used. Four types of bioabsorbable membranes were used as cell carrier: OsseoGuard®, Genderm®, poly (lactic-co-glycolic) acid (PLGA) and poly (lactic-co-glycolic) acid associated with hydroxyapatite (PLGA+HA). Proliferation assays, degradation analysis by scanning electron microscopy (SEM) cell viability assay (MTT) and pH analysis of the culture mediums were used to evaluate the membranes. The proliferation index was not statistically significant between groups, yet all the membranes allowed cell proliferation. The SEM analysis showed that the membranes based on polymers (PLGA and PLGA HA) have more appropriate scaffolds characteristics for tissue engineering. The level of cell viability decreased and the pH levels were similar for all groups except that PLGA. The PLGA+HA membrane has the best biological and structural functions as a scaffold for tissue engineering