Estudo de parâmetros entomológicos com importância para a transmissão de malária por Anopheles gambiae s.l. na Guiné-Bissau

Na Guiné-Bissau, algumas das descrições efetuadas sobre a distribuição das espécies do complexo Anopheles gambiae são anteriores à distinção entre formas moleculares e, em estudos mais recentes, esta caraterização é maioritariamente efetuada na região litoral pelo que as possíveis diferenças associadas à transição entre biótopos se encontram por clarificar. Nesta região, verificam-se também, elevadas taxas de hibridação entre A. gambiae e A. coluzzii sugerindo a ocorrência de uma zona de contato secundário. Assim, o estudo da distribuição das espécies do complexo A. gambiae e a extensão geográfica onde ocorrem híbridos torna-se relevante, já que as várias espécies possuem diferentes padrões comportamentais e, por estarem adaptadas a diferentes biótopos, influenciam os padrões de transmissão de malária, a dispersão de genes de interesse, bem como a aplicação de estratégias de controlo vetorial. Efetuaram-se colheitas entomológicas de mosquitos adultos num transeto Este- Oeste, percorrendo diversos biótopos na Guiné-Bissau. A identificação molecular das espécies foi realizada com recurso aos marcadores IGS e SINE. Foram pesquisadas mutações kdr (L1014S e L1014F) e a mutação G119S no gene ace-1. Foram ainda determinados índices de antropofilia e taxas esporozoíticas de Plasmodium falciparum, com recurso a técnicas de ELISA. Na amostra total, A. gambiae foi a espécie mais abundante (50%), sendo a mais frequente nas regiões litoral e interior. Anopheles coluzzii foi a segunda espécie mais abundante (23%), predominando na região central. Observou-se uma frequência elevada de híbridos (21%) em particular na região litoral, confirmando estudos anteriores. Anopheles melas e A. arabiensis foram também identificados, com frequências bastante inferiores, 5% e 1%, respetivamente. A presença de A. arabiensis na região litoral é um novo achado, podendo representar uma recente introdução ou ser o resultado da ocorrência de uma população reduzida, não identificada anteriormente pela não utilização de métodos de colheita apropriados. Destaque ainda para as diferenças observadas na distribuição de mutações kdr em A. gambiae, sendo rara a presença da mutação L1014F na região litoral mas com uma frequência elevada na região interior, sugerindo uma subdivisão nas populações de A. gambiae como resultado da existência de barreiras ao fluxo genético (região florestal), da adaptação aos diferentes biótopos e a diferentes pressões seletivas. Para além de se ter verificado a presença de A. arabiensis na região costeira e em particular em Antula, verificou-se que esta população foi a única a apresentar a mutação L1014S juntamente com a mutação L1014F. As espécies A. gambiae e A. coluzzii, consideradas altamente antropofílicas, apresentaram baixos níveis de antropofilia, sugerindo a presença de populações de mosquitos capazes de adaptarem o seu comportamento às condições ambientais existentes, nomeadamente a procura por hospedeiros alternativos, com consequências nos padrões de transmissão de malária.Previous reports on the Anopheles gambiae complex species distribution in Guinea Bissau, pre-date the description of A. gambiae molecular forms or, in more recent surveys, the characterization is mainly focused in the coastal area. Consequently the possible differences associated with the transition between bio-ecological regions remains undetermined. In this region, high levels of hybridization between A. gambiae and A. coluzzii where previously described, suggesting the hypothesis that the country may contain the core of a secondary contact region between the two species. The A. gambiae complex species distribution and the geographic extension of hybridization occur are of upmost importance, since bioecological and behavioral differences between species (and hybrids) may affect malaria transmission. Moreover, the different spread of insecticide resistance mechanisms in the two species, such as the knock-down resistance (kdr), should be taken into consideration when planning insecticide-based control activities against these vectors. Collections of A. gambiae s.l. females were carried out along a west to east transect in Guinea Bissau including 12 sites, crossing several biotopes. Molecular identification of the specimens was carried out using IGS and SINE markers. The kdr mutations (L1014F and L1014S) and ace-1 (G119S) mutation were also investigated. The origin of blood-meal of fed females and Plasmodium falciparum sporozoite rates were determined by ELISA. Overall, A. gambiae prevailed (50%) followed by A. coluzzii (23%). Anopheles gambiae was the most abundant species in the coastal and inland regions and A. coluzzii was the most frequent in the central region. A high proportion (21%) of hybrids between A. coluzzii and A. gambiae was also recorded, being highest in the coastal area, in agreement with previous studies. Anopheles melas and A. arabiensis were also identified but their relative frequencies were low, 5% and 1%, respectively. The presence of a previouslyundetected population of A. arabiensis in the coastal region is an unexpected finding and may represent a recent introduction or the result of a small population that could have remained undetected in previous surveys due not only to its low abundance, but also to inadequate sampling methodology. The frequency of the L1014F mutation in A. gambiae was low in central and coastal regions, but high in the inland region, suggesting restrictions to gene flow between eastern and central/western populations in the country. Anopheles coluzzii specimens were characterized by the almost exclusive presence of the kdr susceptible allele. The western population of A. arabiensis in addition of carrying the L1014F mutation was the only species to present the L1014S mutation. The highly antropophilic species, A. gambiae and A. coluzzii, showed low levels of anthropophily, suggesting the presence of mosquito populations able to adapt their behavior to environmental conditions, namely in host seeking, with a potential impact on malaria transmission