Estudo da transdução de sinais dos hormônios tireoideos no transporte de aminoácidos: via-não genômica

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia.Os hormônios tireoideos classicamente atuam através da ligação com receptores nucleares. No entanto, estas iodotironinas também podem atuar por mecanismos não-genômicos ou extranucleares sinalizando novas vias de regulação celular. O objetivo deste estudo foi investigar o envolvimento da síntese de proteínas na ação estimulatória dos hormônios tireoideos no transporte de aminoácidos e caracterizar os canais de potássio envolvidos no efeito hiperpolarizante destes hormônios em células de Sertoli de testículos de ratos imaturos. O sistema A de transporte de aminoácidos e a técnica eletrofisiológica são metodologias utilizadas neste trabalho para os estudos moleculares de hormônios e fármacos em ensaios biológicos in vitro. Recentemente foi demonstrado que o T3 estimula o transporte de aminoácidos e induz uma hiperpolarização no potencial de repouso de células de Sertoli de testículos de ratos imaturos. Os resultados do presente trabalho demonstraram que o T4 (tiroxina) estimula o transporte do aminoácido neutro [4C]-MeAIB e induz uma hiperpolarização no potencial de repouso de células de Sertoli, assim como demonstrado anteriormente pelo hormônio T3. O T4 estimulou o transporte de [14C]-MeAIB numa faixa de concentração mil vezes menor do que o melhor estímulo observado para o T3 e a ação estimulatória do T4 no transporte de aminoácidos não foi alterada com a síntese protéica inibida por ciclo-heximida. Já, para o T3, o efeito estimulatório no transporte de aminoácidos foi parcialmente inibido com a síntese protéica previamente bloqueada, sugerindo que este hormônio necessita da síntese protéica ativa para regular eficientemente esta ação. Nos estudos eletrofisiológicos, o T4 demonstrou um efeito hiperpolarizante nas células de Sertoli menor quando comparado com o T3. O efeito hiperpolarizante do T3 no potencial de repouso das células de Sertoli foi totalmente inibido pelo verapamil e parcialmente inibido por tolbutamida, indicando o envolvimento de canais de cálcio dependentes da voltagem e de canais de K+ ATP, respectivamente, neste mecanismo. Na presença de TEA, o efeito hiperpolarizante do T4 e do T3 no potencial de repouso das células de Sertoli foi totalmente inibido, caracterizando o envolvimento de canais de K+ dependentes da voltagem nesse mecanismo. Na presença de apamina, o efeito hiperpolarizante do T4 foi totalmente bloqueado, caracterizando o envolvimento de canais de K+ dependentes de Ca++ neste mecanismo. Destes resultados podemos concluir que o T4 e o T3 estimulam o transporte de aminoácidos por mecanismos diferentes, uma vez que a ação estimulatória do T4 no transporte de aminoácidos é mais potente e independe da síntese protéica ativa