Method development and validation for the assesment of hormonal active substances residues in biological material by GC/MS

Tato diplomová práce se věnuje problematice výskytu a stanovení hormonálně účinných látek v biologickém materiálu. Cílem experimentální části bylo vyvinout a validovat analytickou metodu, vhodnou pro stanovení hormonálně účinných látek v biologickém materiálu. Vypracovaná metoda může sloužit jak ke screeningovému stanovení skupiny některých steroidních hormonálně účinných látek v moči hospodářských zvířat, tak k provádění konfirmačních analýz stejné skupiny látek ve stejné matrici na požadované koncentrační úrovni. Použitá metoda je tedy určená ke kvantitativnímu stanovení steroidů v nízkých koncentracích v moči hospodářských zvířat. Mimo jiné splňuje kritéria konfirmačních metod určených pro sledování reziduí hormonálně účinných látek v biologickém materiálu dle Směrnice Rady 2002/657/EC. Zjištěné parametry metody odpovídaly předpokládaným hodnotám. Metoda se ukázala jako zcela vyhovující, poskytovala žádané výsledky. Jednotlivé analyty byly s jistotou identifikovány, poskytovaly výrazné, symetrické a dobře oddělené píky. Diplomová práce byla vypracována v Ústavu pro státní kontrolu veterinárních biopreparátů a léčiv v Brně.This diploma thesis is focused on the problematics of occurence and quantitative determination of hormonal active substances in biological material. The aim of experimental part was to develope and validate the analytical method, suitable for quantification of hormonal active substances in biological materials. Elaborated method is able to be used for screening determination of some steroid hormonal active substances in urine of farming animals, and for performance confirmative analysis of the same substances in the same matrix on required concentration level. Used method is determined for quantification of steroids in low concentration level in urine of farming animals. Among others performs the criteria of confirmative methods intended for monitoring of residues of hormonal active substances in biological material according to Council Directive 2002/657/EC. Determined parameters of the method answer the supposed values. The method proved to be quite suitable and offered required results. Individual analytes were identified,with certainty, they offer expressive, symmetrical and well separated peaks. This diploma thesis was prepared in Institute for State Control of Veterinary Biologicals and Medicaments in Brno.