Taxonomic submission of Saccharomyces yeast from selected matrices

Tato diplomová práce se zabývá optimalizací metod kultivace, izolace a identifikace jednotlivých kmenů kvasinek z vybraných matric využitím metod molekulární biologie. Jako matrice byly použity hrozny, listy vinné révy a půda z vinice. Protože kvasinky jsou nedílnou součástí fermentačních procesů, používají se tedy i při výrobě vína, u kterého ovlivňují organoleptické vlastnosti. K identifikaci kvasinkových kmenů byla použita metoda PCR-RFLP. Pro analýzu byly použity úseky kvasinkové DNA, které jsou specifické pro každý druh. Tyto úseky byly pomocí PCR naamplifikovány a následně podrobeny restrikční analýze pomocí specifických restrikčních endonukleas. Získané fragmenty byly detekovány horizontální elektroforesou. V literární rešerši jsou zpracovány základní informace o vinařství, kvasinkách, jejich kultivaci a izolaci, PCR, restrikční analýze a horizontální elektroforese.This thesis explores the optimizing of the methods relevant to the cultivation, isolation, and identification of individual yeast strains from selected matrices, using the molecular biology methods. Grape berries, vine-leaves and soil from vineyard have been used as matrices. As yeasts are an integral part of fermentation processes, they are used for making of wine, the organoleptic charakteristics of which they influence. For identification of yeast strains the PCR-RFLP method has been used. Specifity of yeast DNA sequences of certain species has been used for this analysis. These spacers have been amplificated through the use of PCR and consequently they have been subjected to a restrictive analysis with specific restrictive endonucleases. These fragments have been detectioned through horizontal electrophoresis. In the literature background research section the basic informations about viticulture, yeasts, their cultivation and separation, PCR, restrictive analysis and horizontal electrophoresis is presented.