Caracterización del impacto de IL-6 en la respuesta inmune innata y adaptativa en la enfermedad de chagas

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2017La producción de óxido nítrico (NO) es un mecanismo clave para la defensa contra los patógenos intracelulares, pero debe ser estrictamente controlada a los fines de evitar el daño tisular generado por un excesivo estrés oxidativo. En el presente trabajo de tesis describimos un nuevo mecanismo a través del cual interleuquina (IL)-6 regula la liberación de NO inducida en respuesta a la infección con el parásito cardiotrópico Trypanosoma cruzi. Empleando un modelo murino de infección con Trypanosoma cruzi encontramos que, en contraste con los ratones salvajes de la cepa C57BL/6 (WT), los deficientes en IL-6 (IL6KO) exhiben un gran aumento en los niveles plasmáticos de NO concomitante con mayor cantidad de IL-1β y monocitos inflamatorios circulantes. La alta producción de NO se asoció a un marcado incremento en los niveles cardíacos de malondialdehído (indicador de daño oxidativo) y en la tasa de apoptosis de células en miocardio. El tratamiento con un inhibidor de la producción de NO disminuye significativamente la mortalidad de animales infectados deficientes en IL-6. Además, el aumento del estrés oxidativo conllevó a desórdenes cardiovasculares evidenciado a través de un aumento en los niveles de glucosa y mayor daño renal en los animales deficientes infectados. Por otro lado, estudiando las características funcionales y fenotípicas de las células circulantes en sangre periférica de pacientes chagásicos y células de donantes seronegativos infectadas experimentalmente con T. cruzi, encontramos que diferentes mecanismos reguladores alteraban las funciones efectoras de la población T citotóxica de pacientes seropositivos. Los leucocitos periféricos de pacientes chagásicos mostraron una mayor producción de NO concomitante con el aumento de la nitración de residuos tirosina en células T CD8+. Además, esta población citotóxica exhibió una mayor tasa de apoptosis, niveles más bajos de expresión de la cadena ζ de TCR y de CD107a, un marcador de degranulación. Sorprendentemente, la estimulación con IL-6 de células mononucleares de sangre periférica obtenidas de donantes sanos infectadas in vitro con T.cruzi, redujo la nitración de células CD3+ CD8+ y aumentó la tasa de sobrevida. Además, el tratamiento de estos cultivos con un anticuerpo neutralizante de IL-6 aumentó el porcentaje de nitración de células T CD8+ inducida por T. cruzi y aumentó la liberación de NO. Estos resultados sugieren que la falta de respuesta de la población de células T citotóxicas observada en el establecimiento de la activación constante a largo plazo del sistema inmune podría ser revertida por las acciones pleiotrópicas de IL-6, ya que esta citoquina mejora su supervivencia y funciones efectoras. Nuestros datos evidencian que IL-6 tiene un rol clave en regular la excesiva liberación de NO a través de la inhibición de IL-1β, y resaltan la importancia de conocer los efectos Resumen 7 pleiotrópicos de IL-6, considerando que esta citoquina es blanco terapéutico para diferentes patologías de naturaleza inmunológica.Sanmarco, Liliana María. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Aoki, María Del Pilar. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Cervi, Laura Alejandra. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Degano, Alicia Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Pérez, Ana Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Inmunología Clínica y Experimental de Rosario; Argentina.Daniotti, José Luis. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina