Efectos de Interleuquina-6 en la regulación de la proliferación y senescencia de células hipofisarias normales y tumorales en cultivo primario.

Tesina (Grado en Ciencias Biológicas)--Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Lugar de Trabajo: Centro de Microscopía Electrónica. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. INICSA-CONICET. Facultad de Ciencias Médicas. U.N.C. 2017. 50 h.; ils.; grafs.; tabls. . Contiene Referencia BibliográficaLa senescencia celular es actualmente considerada una respuesta al estrés y está caracterizada por un arresto estable del ciclo celular acompañado de aumentos en la expresión de diferentes citoquinas, entre ellas interleuquina 6 (IL-6), la cual es necesaria para la inducción y mantenimiento de este proceso. En el presente trabajo de Tesina se propuso evaluar, in vitro, los efectos de IL-6 exógena y endógena sobre la proliferación y senescencia de células hipofisarias normales y tumorales. Para este fin se realizaron cultivos primarios adenohipofisarios de ratas macho Wistar adultas a las que se indujo el desarrollo tumoral mediante la implantación subcutánea de capsulas de silástico conteniendo benzoato de estradiol (10mg) durante 40 días (E40). Animales controles fueron implantados con capsulas vacías (n=8/cultivo). Al quinto día de cultivo, las células fueron expuestas a IL-6 exógena (1-10ng/ml; 24h) en tanto que los efectos de IL-6 endógena fueron evaluados mediante el desafío con lipopolisacárido bacteriano (LPS; 0,1-2μg/ml; 24h). Además, las células fueron incubadas con Brefeldin-A, bloqueante de la secreción (BFA; 0,1μg/ml; 2h) o con BAY, inhibidor de la translocación nuclear de NF-B (1μg/ml, 24h) solos o combinados con LPS. Con posterioridad a los tratamientos se evaluó: la actividad de β-galactosidasa asociada a senescencia (SA-β-gal) por ensayos citoquímicos; la proliferación celular mediante la inmunodetección de Ki67; la expresión de IL-6 por inmunofluorescencia (IF); secreción esta citoquina mediante ELISA y la expresión del factor de transcripción NF-B por western blot. Para el análisis estadístico de los datos, se empleó MLGM y Test de Fisher (p