Preparation of fluorescently labeled substrates and determination of transglycosylation activity in plants

Tato bakalářská práce byla zaměřena na přípravu fluorescenčně značených oligosacharidů a na stanovení transglykozylačních/heterotransglykozylačních aktivit enzymů ze semen dvouděložných rostlin. Jako modelové organismy se využily Lichořeřišnice větší a petržel Olomoucká dlouhá. Kvalita a složení značených akceptorových substrátů se monitorovala pomocí TLC a MALDI-TOF MS. Přítomnost enzymů v semenech rostlin se analyzovala pomocí SDS elektroforézy a IEF-PAGE. Transglykozylační aktivity se detekovaly s využitím papírové metody a HPLC. Výsledky naznačují, že v semenech studovaných rostlin se nachází enzymy, které katalyzují heterotransglykozylační reakce.The bachelor's thesis was focused on preparation of fluorescently labeled oligosaccharides and detection of transglycosylating/heterotransglycosylating activities of enzymes from dicotyledons. As the model organisms nasturtium and parsley were used. The quality and composition of labeled acceptor substrates was monitored by TLC and MALDI-TOF MS. The presence of enzymes in the plant seeds was analysed by SDS electrophoresis and IEF-PAGE. The paper method and HPLC were used for the detection of transglycosylating activities. The obtained results suggest that enzymes catalyzing heterotransglycosylating reactions are in the seeds of studied plants.