Effect of copper during bovine oocytes maturation on preimplantation embryo development

El presente trabajo de tesis consistió en evaluar el efecto de la adición de Cu durante la maduración in vitro (MIV) de ovocitos bovinos y sus consecuencias en el desarrollo embrionario preimplantacional. Para tal fin, se establecieron los siguientes objetivos: 1) evaluar la asociación entre las concentraciones de Cu en licor folicular y en plasma; 2) estudiar el efecto del Cu sobre la MIV; 3) evaluar el efecto del Cu durante la MIV sobre la capacidad de desarrollo embrionario y 4) determinar el efecto del Cu en la MIV con ovocitos desnudos, con células del cúmulus en cocultivo o de COC completos. Para ello se utilizó como modelo experimental la Producción in vitro (PIV) de embriones bovino. La PIV se realizó con ovocitos obtenidos de ovarios bovinos de frigorífico. Los resultados mostraron que: 1) la concentración de Cu en el licor folicular está determinado por el estatus de Cu en el plasma; 2) el agregado de Cu al medio de MIV incrementó la concentración intracelular de GSH-GSSG en el ovocito y las CC, 3) disminuyó la tasa de apoptosis y el daño en el ADN en dichas células. Además, 4) el agregado de Cu incrementó la tasa de blastocistos y mejoró la calidad de los embriones; y 5) la tasa de blastocistos aumentó independientemente de la presencia de CC durante la MIV. En consecuencia, este estudio sugiere que el Cu actuaría como un factor importante durante la maduración del ovocito bovino favoreciendo el desarrollo embrionario temprano. Además, las evidencias obtenidas sugieren la posible existencia de transportadores de Cu en el complejo ovocito-cúmulus de bovino.This study evaluated the effect of adding copper (Cu) during bovine in vitro maturation (IVM) on preimplantational embryo development. For this purpose, we established the following objectives: 1) Study the relationship between Cu concentrations in follicular fluids and plasma; 2) Study the effect of different Cu concentrations on IVM of bovine oocytes; 3) Study the effect of different Cu concentrations during IVM on subsequent embryo development to the blastocyst stage; and 5) Study the role of cumulus cells (CC) as metabolic bridge between the external medium and the oocyte. For this end, bovine in vitro embryo production (IVP) was used as experimental model, including IVM, in vitro fertilization and in vitro culture of embryos. The IVP was performed using bovine oocytes obtainer from slaughterhouse. The results showed that: 1) Copper concentrations in follicular fluid depend on Cu plasma concentrations, 2) The addition of Cu to IVM medium increased intracellular GSH-GSSG content in oocytes and CC; 3) The rates of apoptosis and DNA damage, in both oocytes and CC, were reduced when Cu was added to IVM medium; 4) The addition of Cu in IVM medium improved the blastocyst rate and embryo quality; and 5) The percentage of blastocysts was enhanced regardless of the presence of CC during IVM. Consequently, this study indicates that Cu acts as an important factor during bovine oocyte maturation promoting early embryo development. Besides, these results suggest that Cu transporters might exist in bovine cumulus-oocyte complex.Facultad de Ciencias Veterinaria