Effects of phosphatidylserine synthase1 gene mutation under oxidative stress

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 사범대학 과학교육과, 2017. 8. 전상학.인지질은 신경세포에 많이 존재하고 있고, 신경세포의 유지와 생존에 중요하다. 선행 연구에 의하면 인지질의 구성 비율의 변화가 신경 퇴행성 질환을 유발 시킨다고 밝혀지고 있다. phosphatidylserine synthase1(ptdss1)은 phosphatidyl serine(PS)을 합성하는 효소이며, 선행연구는 ptdss1 돌연변이의 신경 퇴행성 질환의 지표는 확인하였지만, 구체적인 기작을 밝히지 못한 한계가 있다. 본 연구는 Mitochondria-associated membrane에 다량 존재하는 ptdss1에서 돌연변이가 일어났을 때 미토콘드리아 막의 항상성에 문제가 발생함에 따라, Reactive oxygen species(ROS)가 과량 발생하는 산화 스트레스 상황에 처하고 이러한 조건이 신경 퇴행성 질환을 유발한다고 예상하였다. H2DCF법을 통해 ptdss1 돌연변이 뇌에서 ROS의 과다 발생을 확인하였다. 그리고 인공적으로 유도한 산화 스트레스 조건에서 ptdss1 돌연변이의 신경 퇴행성 질환의 지표인 생존율의 감소, 뇌의 공포 발생, 뇌에서의 세포사멸 등을 확인할 수 있었다. 이와 같은 결과는 노화가 진행된 ptdss1 돌연변이에서 공포의 형성과 동일하며, 결과적으로 ptdss1 돌연변이에서 노화가 진행되면서 ROS가 축적되고, 이에 따라 뇌조직의 퇴화가 일어날 수 있음을 유추해 볼 수 있다.제 1 장 서 론 1 1. 인지질 1 2. Phosphatidylserine synthase1과 미토콘드리아 막의 안정성 4 3. ROS와 신경 퇴행성 질환 6 4. 연구 목표 7 제 2 장 실험방법 및 실험재료 8 1. 사용된 초파리 8 2. 산화스트레스 처리법 (Oxidative stress treatment) 10 3. ROS level 측정법 (Reactive oxygen species Level Measurement) 11 4. 초파리 수명 측정 (Lifespan) 12 5. 파라핀 절편법 (paraffin section) 13 6. AO 염색법 (Acridine Orange staining) 14 7. 초파리 뇌 해부도 (Drosophila brain anatomy) 14 제 3 장 결 과 16 1. ptdss1 돌연변이 ROS 발생량 16 2. Oxidative stress 조건에서 ptdss1 돌연변이 수명 감소 21 3. Oxidative stress 조건에서 ptdss1 돌연변이 신경 퇴화 24 4. Oxidative stress 조건에서 Cell death (Apoptosis)측정 29 제 4 장 고 찰 36 참고문헌 39 Abstract 50Maste